perfil lipidico, colesterol, triglicérido, VLDL, HDL, LDL

UNIVERSIDAD DE ORIENTE
NÚCLEO BOLÍVAR
ESCUELA DE CIENCIAS DE LA SALUD
“Dr. Francisco Battistini Casalta”
Departamento de Bioanálisis
Área de Bioquímica Clínica

PERFIL LIPIDICO.

PROF: German Guzman.

Bachiller: Yelifer Garcia 17.591.715.

Cuidad Bolivar, Junio del 2008.

INDICE

Introducción…………………………………………..3
Desarrollo……………………………………………….5
Determinación de laboratorio……………………..7
Determinación de Colesterol………………………7
Determinación de HDL-c…………………………..9
Determinación de triglicérido…………………….10
Cálculos…………………………………………………….11
Conclusión………………………….…………………….15
Bibliografía……………………………………………….16

INTRODUCCIÓN.

El perfil lipídico es uno de los exámenes más solicitados al laboratorio Clínico. Incluye la cuantificación de los niveles de colesterol total, triglicéridos, lipoproteínas de alta densidad (HDL) y lipoproteínas de baja densidad (LDL).

Es función del Laboratorio de Química Clínica la selección, ejecución y evaluación de pruebas cualitativas, semicuantitativas y cuantitativas de un sinnúmero de especímenes biológicos.

Dentro de este rango de pruebas, las mediciones o cuantificaciones de diversos analitos, tal es el caso de la glucosa, el colesterol, los triglicéridos entre otros, provee información clínicamente útil para el diagnóstico, control de diversas alteraciones que afectan al individuo e igualmente permiten la evaluación de riesgo, son aplicables en estudios forenses y con fines científicos.

Por su amplísima aplicación y como apoyo decisivo que la Química Clínica es en el manejo de los pacientes, es de capital importancia que los valores reportados por el Laboratorio sean correcto y por tanto se deben tener en mente los factores que afectan dichos resultados, entre los cuales se pueden encontrar tres grupos principales:

1. Los relacionados con la preparación del paciente, obtención de la muestra, procesamiento y almacenamiento que corresponden a la denominada fase preinstrumental.

2. Los relacionados con la disposición de muestras, metodologías de pruebas exactitud, precisión.

3. Por último, la evaluación en el cual se tendrá en cuenta lo referente a control de calidad y la remisión del reporte al profesional que solicita.

Posteriormente tiene lugar el análisis de dicho resultado frente al estado clínico o historia del paciente y la decisión tomada y basada parcialmente en tal resultado por parte del facultativo.

Dentro de la fase preinstrumental, se sabe en una forma más o menos consistente como el ejercicio ,ayuno ,dieta ingestión de alcohol , hábito de fumar, drogas ,posición , torniquete y stress influyen notoriamente en los resultados y son responsables de la variabilidad observada, Igualmente en la toma de la muestra: el sitio de punción , material empleado en la recolección , interferencia por drogas, evaporación, estabilidad de los componentes inhabilitan una muestra para proveer la información que se espera.

El colesterol es una sustancia presente en el plasma y en los tejidos, esencial para la vida. Es el componente más importante de la membrana de todas las células del cuerpo humano y de los animales. A partir del colesterol el cuerpo sintetiza ácidos biliares, hormonas esteroideas y vitamina D. Una parte del colesterol ingresa al organismo por los alimentos y otra parte se produce en el hígado.

TIPOS DE LIPOPROTEÍNAS:

LDL: Lipoproteínas de baja densidad. Transportan el colesterol malo y se obtienen mediante el consumo de grasa animal, como huevos, derivados de la leche y carnes rojas. Éstas son agresoras, porque se depositan directamente en las arterias, lo que aumenta el riesgo de sufrir un accidente cardiovascular.

VLDL: Lipoproteínas de muy baja densidad, que transportan triglicéridos. Éstos provienen del azúcar refinada y el alcohol. Cuando están muy altas hacen que el LDL sea aún más malo, más denso, pequeño y con mayor predisposición a depositarse en las arterias. Por lo tanto, en las personas con triglicéridos altos no es conveniente el consumo de alcohol.

HDL: Lipoproteínas de alta densidad. Transportan el colesterol bueno y son protectoras, porque están encargadas de evitar que las lipoproteínas agresoras se peguen a las células y provoquen daños en nuestro cuerpo.

Los triglicéridos son el principal tipo de grasa transportado por el organismo. Recibe el nombre de su estructura química. Luego de comer, el organismo digiere las grasas de los alimentos y libera triglicéridos a la sangre. Estos son transportados a todo el organismo para dar energía o para ser almacenados como grasa.

El hígado también produce triglicéridos y cambia algunos a colesterol. El hígado puede cambiar cualquier fuente de exceso de calorías en triglicéridos.



En la sesión de hoy realizaremos todas estas pruebas:
1.- Colesterol.
2.- Hdl-c.
3.- Triglicérido.
Y se calcular la fracción de Ldl y Vldl.

DESARROLLO.

Un perfil lipídico es un grupo de pruebas solicitadas generalmente de forma conjunta para determinar el riesgo de enfermedad cardiaca coronaria. Las pruebas que conforman un perfil lipídico han mostrado ser buenos indicadores de la posibilidad de presentar un ataque cardiaco o apoplejía provocados por obstrucción de los vasos sanguíneos (endurecimiento de las arterias).

El perfil lipídico incluye el colesterol total, el HDL-colesterol (denominado a menudo “colesterol bueno”), el LDL-colesterol (denominado a menudo “colesterol malo”) y los triglicéridos. Algunas veces, el informe incluirá valores adicionales calculados como la relación HDL/colesterol o cálculos basados en los resultados del perfil lipídico, edad, sexo y otros factores de riesgo.

El perfil lipídico se utiliza como guía para decidir como debe ser tratada una persona en situación de riesgo. Los resultados del perfil lipídico son considerados conjuntamente con otros factores de riesgo conocidos de la enfermedad cardiaca para proporcionar un plan de tratamiento y seguimiento.

El tratamiento está basado en el riesgo global de presentar enfermedad cardiaca coronaria. Se asigna un valor diana de LDL-colesterol. Si el resultado de la concentración de LDL-colesterol está por encima del valor diana, es necesario el tratamiento. El valor diana de LDL-colesterol es:

LDL-colesterol menor de 100 mg/dL (2.59 mmol/L) si se tiene enfermedad cardiaca o diabetes.
LDL-colesterol menor de 130 mg/dL (3.37 mmol/L) si se presentan 2 ó más factores de riesgo.
LDL-colesterol menor de 160 mg/dL (4.14 mmol/L) si se presentan menos de 2 factores de riesgo.

Existe un grupo de factores de riesgo relacionados con su estilo de vida entre los que se cuenta la obesidad, inactividad física y dieta aterogénica (dieta que aumenta la concentración de lípidos (grasa) en la sangre. La principal forma de mantener los valores del perfil lipídico en el rango deseable es el cambio terapéutico del estilo de vida. Las modificaciones que usted debe hacer son las siguientes:

1. Reducir el consumo de grasa saturada y colesterol. La tabla presenta la lista de los alimentos recomendados y aquellos que deberá eliminar de su dieta.

2. Incrementar la actividad física (30 minutos de ejercicio diariamente).

3. Control de peso: su dietista le hará un plan para control del sobrepeso y obesidad.

El colesterol es un esterol (lípido) que se encuentra en los tejidos corporales y en el plasma sanguíneo de los vertebrados. Se presenta en altas concentraciones en el hígado, médula espinal, páncreas y cerebro. El nombre de «colesterol» procede del griego kole (bilis) y stereos (sólido).

El colesterol es imprescindible para la vida por sus numerosas funciones:

1. Estructural: el colesterol es un componente muy importante de las membranas plasmáticas de los animales (en general, no existe en los vegetales). Aunque el colesterol se encuentra en pequeña cantidad en las membranas celulares, en la membrana citoplasmática lo hallamos en una proporción molar 1:1 con relación a los fosfolípidos, regulando sus propiedades físico-químicas, en particular la fluidez. Sin embargo, el colesterol se encuentra en muy baja proporción o está prácticamente ausente en las membranas subcelulares.

2. Precursor de la vitamina D: esencial en el metabolismo del calcio.

3. Precursor de las hormonas sexuales: progesterona, estrógenos y testosterona.

4. Precursor de las hormonas corticoesteroidales: cortisol y aldosterona.

5. Precursor de las sales biliares: esenciales en la absorción de algunos nutrientes lipídicos y vía principal para la excreción de colesterol corporal.

6. Precursor de las balsas de lípidos...

Cuando los niveles de colesterol son elevados pueden causar ateroesclerosis, un desorden caracterizado por el acúmulo de moléculas de colesterol en la pared de los vasos sanguíneos. Con el tiempo estos depósitos aumentan de tamaño, se endurecen y se pueden calcificar. Como resultado el calibre del vaso se reduce y produce obstrucción de las arterias.

El colesterol como sustancia lipídica (grasosa) no se disuelve en la sangre, por esta razón requiere de sustancias que lo transporten desde el sitio de producción hasta la célula. Las lipoproteínas de baja densidad LDL, también llamado colesterol malo, son las responsables de esta actividad. Las lipoproteínas de alta densidad (HDL) o colesterol bueno, son responsable de transportar el exceso de colesterol de los tejidos al hígado, reduciendo así la concentración en la sangre.

El organismo necesita colesterol para funcionar normalmente. Sin embargo, tener demasiado puede elevar sus probabilidades de sufrir una enfermedad del corazón. Infórmese sobre la relación ente el colesterol y la salud cardiovascular.

Los triglicéridos son sustancias lipídicas (grasa) presentes en algunos alimentos y fabricados por el hígado. Son absorbidos por la digestión y transportados a los tejidos donde se almacenan en forma de grasa, constituyendo la principal reserva de energía del organismo. Ésta es liberada cuando los músculos y el cerebro lo necesitan.

Puede tener varias causas para aumentar los triglicéridos:

· Exceso de peso: los triglicéridos aumentan generalmente a medida que aumenta el peso

· Consumo excesivo de calorías: Los triglicéridos se elevan a medida que se aumenta de peso o se ingieren demasiadas calorías, especialmente provenientes de azúcar y del alcohol. El alcohol aumenta la producción de triglicéridos en el hígado.

· Edad: los niveles de triglicéridos aumentan regularmente con la edad.

· Medicamentos: Algunas drogas como los anticonceptivos, esteroides, diuréticos causan aumento en los niveles de los triglicéridos.

· Enfermedades: La diabetes, el hipotiroidismo, las enfermedades renales y hepáticas están asociadas con niveles altos de triglicéridos. Entre los grupos que deben vigilar con mayor cuidado su nivel de triglicéridos se encuentran los diabéticos y las mujeres después de la menopausia. Más de un 75% de los diabéticos tienen los niveles de triglicéridos altos y el 30% de las mujeres que han pasado por la menopausia sufren de este mismo problema.

· Herencia: algunas formas de altos niveles de triglicéridos ocurren entre miembros de una misma familia.

DETERMINACION DE LABORATORIO.

Determinación de colesterol total enzimático. (laboratorios biogamma,ca)

Fundamento:

La determinación de Colesterol total esta basada en el procedimiento enzimático descrito por Allain, donde la colesterol---- esterasa (CE) hidrolizan los esteres de colesterol a colesterol libre y ácidos grasos. En presencia de oxigeno, el colesterol libre es oxidado por la colesterol oxidasa (CO) a cholest-4-en-3-one y peróxido de hidrogeno. Cuando el fenol esta oxadativamente acoplado con 4-aminoantipirina en la presencia de peroxidasa (HPO), y peróxido de hidrogeno se produce un cromoforo de quinoneimina. La intensidad del color producido es proporcional a la concentración de colesterol y se mide colorimétricamente a cerca de 500nm.

Esteres de colesterol -----CE------- colesterol + ac. Grasos

Colesterol + O2 ------------CO------- Colest-4-en-3-one + H2O2

2H2O2 + 4-aminoantipirina + fenol ----------HPO----- quinonenica + 4H2O

La separación del HDL-colesterol, esta basada en la separación en la selectividad de los iones fosfotungstico y magnesio para precipitar todas las lipoproteínas con excepción del HDL.colesterol. después de la centrifugación el HDL-colesterol contenido en el liquido sobrenadante, se determina con el mismo método que se determino el colesterol total.

Muestra.

Las muestras mejor recomendadas son Suero recién extraído y no hemolizado. También se pueden usar plasma obtenido con EDTA.

Se recomienda un ayuno de 12-14horas antes de la extracción de la muestra, sobre todo si también se le va hacer la determinación de triglicéridos a la misma muestra. Sin no cumplen este requisito no deben usarse para determinar colesterol y HDL-Colesterol.

El colesterol en suero o plasma es estable:
-Por 5 día a temperatura ambiente.
-2 semanas refrigeradas
-6 meses si se congela.
NOTA: el HDL-colesterol no debe congelarse para es estable hasta 5 días refrigerado.

Limitaciones del Método.

-Niveles de ácido ascórbico tan altos como 10 mg %, No Interfieren en la prueba
-El presente método de Colesterol, á demostrado ser lineal hasta 500 mg/dl. Mas allá de este límite, las muestras deberán diluirse con solución salina (0,85%) y ensayadas nuevamente. El nuevo resultado deberá multiplicarse por el factor de dilución.

Procedimiento del método.

1.- Se marcaron 3 tubos: una para la muestra (M), otro para el estándar (St) y otro para el blanco reactivo (BR).
2.- A cada tobo marcado se le agrego 1 ml de reactivo de colesterol y lleve a temperatura de reacción.
3.- Se pipetea 10ul (0,010ml) de cada muestra o 50ul de sobrenadante de HDL-colesterol, al tubo de muestra. Se tapa y mezcla por inversión.
4.- Se pipetea 10ul de estándar de colesterol y se agrega en el tubo rotulado para el estándar. Se tapa y mezcla por inversión.
5.- Se incuban todos los tubos a 37º C por 5 min o 15 min a temperatura ambiente.
6.- Después de la incubación se mezclan todos los tubos por inversión y lea dentro de los 30 min siguientes.
7.-Leer a 500nm. Se lleva a 0 con el blanco reactivo.

Técnica.

………………Muestra………….Estándar…………….. Blanco reactivo.....................
Muestra………..10 ul…………………………………………………………………………..…
Estándar……………………………..… 10 ul……………………………………………………
Reactivo………...1ml……………………1ml…………………………1ml……………………

Determinación de HDL-c.

Para determinar los valores de HDL-c, se deben utilizar 50ul del sobrenadante obtenido por este procedimiento del colesterol total, en la técnica descrita anteriormente.

1.- Se marca el tubo de la muestra que se va a ensayar.
2.- Pipetea 500ul al tubo.
3.- Se agrega 50 ul de HDL- precipitante al tubo y poner en un vortex por 10 seg.
Entre estos reactivos precipitantes son una mezcla del ácido fosfotungstico con hidróxido de sodio y cloruro magnesio con surfactante. Que precipitan a las LDL y VLDL (lipoproteínas de muy baja densidad) mientras que las HDL permanecen en solución.
4.-Secentrifuga a alta velocidad por 10 min para obtener un liquido sobrenadante bien claro.
5.- Se utilizan 50ul del sobrenadante y 50ul del estándar de HDL-c para hacer el procedimiento del colesterol total.

Técnica.

----------------Muestra------------Estándar-----------Blanco reactivo
Muestra-----0.050ml------------------------------------------------------
Estándar----------------------------0.050ml-------------------------------
Reactivo--------1ml-------------------1ml-----------------1ml-----------
Mezclar e Incubar 5 min a 37ºC (ó 10 min a temperatura ambiente).
Leer la absorbancia a 505 nm.

Limitación del método.

Muchos anticonceptivos orales hacen disminuir los valores de HDL e incrementar los niveles de LDL. Los estrógenos han reportado efectos inversos.

Determinación de triglicérido.( casa comercial Chemroy).

Fundamento:

Para establecer el diagnostico de hiperlipoproteinemia primaria o secundaria, es útil la cuantificación de triglicéridos en conjunto con otros lípidos. También es útil para dar seguimiento a la diabetes mellitus, nefrosis, obstrucción biliar y variar anormalidades metabólicas que resultan de disturbios endocrinos.

1.- El glicerol y los ácidos grasos se forman en una primera etapa por la acción de la lipasa sobre los triglicéridos.

2.- El glicerol se fosforila por la adenosin-5-trifosfato (ATP) para producir glicerol-3-fosfato (G-3-P) y adenosin 5-difosfato(ATP) para producir glicerol-3-fosfato (G-3-P) y adenosin 5-difosfato(ATP) en una reacción catalizada por la glicerol-kinasa (GK).

Glicerol + ATP-----GK--------- G-3-P + ADP

3.- La G-3-P es oxidada por la gliceril fosfato oxidasa (GPO) produciendo deshidroxiacetona fosfato (DAP) y peróxido de hidrógeno.

G-3-P + O2 --------GPO------ DAP + H2O2

4.- Los peróxidos reaccionan con 4-aminoantipirina y 4-clorofenol bajo la influencia catalítica de la peroxidasa (POD) para formar quinoneimina.

2H2O2 + 4-amionopirina ----POD----- quinoneimina + HCL + 4H2O

El factor aclarador lipemico (LCF) es una mezcla de aditivos especialmente diseñado por Biocheminal Trade integrados dentro del reactivo de triglicéridos para ayudar a minimizar las interferencias debidas a la lipemia.

Muestra

-La heparina y EDTA son los anticoagulantes de elección.
-No deben usarse fluoruros ni oxalatos. Separa el suero o el plasma
-Los TG son estables por 10 días a 2-8’C
-No deje las muestra a temperatura ambiente, ya que los fosfolipidos pueden hemolizarse liberando glicerol libre, falsamente aumentados los TG

Sustancias interferentes

-No debe usarse material que contenga glicerina
-Muestras hemolizadas

Procedimiento y técnica.

……………………….Reactivo Blanco……………….Estándar…………………….Muestra….
Reactivo………………1 ml………………..................1 ml………………………………1 ml……
Estándar…………………………………………………..10 ul………………………………………..
Muestra……………………………………………………………………………………………10 ul….
Incuban todos los tubos por 5 min a 37º C, o a temperatura ambiente 10 min.
Leer a 500nm antes de 15 minutos. Se lleva a 0 abs con el blanco reactivo.

CALCULOS DE LOS DIFERENTES ANALITOS PROCESADOS.

Colesterol:

[st]=200mg/dl
Lectura del st= 0,153
Lectura de la muestra= 0,100
Fc = [st] /lectuta del st.
Fc: 200mg/dl / 0,153 abs= 1307,20 mg/dl
[Colesterol]=Fc * lectura de la muestra
[Colesterol] = 1307,20 mg/dl * 0,100= 130,7 mg/dl
[Colesterol] = 131 mg/dl.

HDL-c:

[st] = 50 mg/dl.
Lectura del st= 0,284.
Lectura de la muestra= 0,133.
Fc = 50mg/del / 0,284 = 176,06 mg/dl.
[HDL-c] = 176,06 md/dl * 0,133 = 23,41 mg/dl
[HDL-c] = 23 mg/dl.

Triglicéridos.

[st]= 200 mg/dl.
Lectura del st= 0,280.
Lectura de la muestra= 0,178
[Triglicérido]= lectura de la muestra/ lectura del st * [st]
[Triglicéridos] = 0,178 / 0,280 * 200mg/dl = 127,14 mg/dl
[Triglicéridos] = 127 mg/dl.

VLDL.
[VLDL] = [triglicérido]/ 5.
[VLDL] = 127 / 5 = 25,4 mg/dl
[VLDL] = 25 mg/dl.

LDL.
[LDL] = [colesterol] – [HDL-c] – [VLDL]
[LDL] = 131 – 23 – 25 = 83 mg/dl

Colesterol total.

[ colesterol total]= [ldl] + [vldl] + [hdl]

[colesterol total] 83 + 25 + 23 = 131 mg/dl.

CONCLUSION.

PX: femenina

Edad: 29 aº

.........................valores obtenidos............................... valores de referencia.............

Colesterol........... 131 mg/dl............................................150 - 250 mg/dl..................

VLDL.................. 25 mg/dl...............................................16 -36 mg/dl......................

HDL.....................23 mg/dl...............................................39 -43 mg/dl......................

LDL.....................83 mg/dl...............................................83 - 140 mg/dl....................

Triglicérido....... 127 mg/dl.............................................50 - 140 mg/dl..................

Debido a los valores obtenidos en el perfil lipidico la paciente de 29 aº se encuentarn todo entre los valore de referncia, asi diagnostica que la paciente no tendra padecimiento de enfermedades coronarias. Pero se debe cuidar, debido a que la alimentacion implica mucho para desencadenar las patologias de al aumentar estos valores aparecen.

BIBLIOGRAFIA

Inserto de biogamma, c.a de colesterol total enzimatico.

Inserto de Chemroy para determinar triglicerido.

http://www.labtestsonline.es/tests/LipidProfile.html?page=5

http://telesalud.ucaldas.edu.co/rmc/articulos/v11e1a5.htm

http://www.congregacionmariana.org.co/images/archivos/laboratorio/cartalaboratorio1.pdf

http://es.wikipedia.org/wiki/Colesterol

geosalud.com/Nutricion/trigliceridos.htm - 31k –

www.alimentacion-sana.com.ar/Informaciones/novedades/colesterol%20bueno.htm - 15k

Glucosa, curva de tolerancia a la glucosa oral

UNIVERSIDAD DE ORIENTE
NÚCLEO BOLÍVAR
ESCUELA DE CIENCIAS DE LA SALUD
“Dr. Francisco Battistini Casalta”
Departamento de Bioanálisis
Área de Bioquímica Clínica.

PRUEBA DE LA TOLERANCIA

A LA GLUCOSA.

Facilitador: German Guzman.

Bachiller: Yelifer Garcia 17.591.715.

Cuidad Bolivar, Junio del 2008

INDICE.

Introducción………………………………….….…….3
Desarrollo…………………………………………..…..4
Glicemia en ayuno……………………………………4
Prueba postpandrial………………………….….…4
Prueba de la tolerancia a la glucosa ora……..5
Hemoglobina glucosilada…………………………..7
Determinación de laboratorio………..………….7
Procedimiento…………………………………………7
Técnica………………………………………………….7
Fundamento……………………………….…………7
Resultados…………………………………………….8
Conclusión………………………………………………8
Bibliografía……………………………………………9

INTRODUCCIÓN

La insulina controla un gran número de procesos metabólicos que van desde la regulación de intermediarios del metabolismo hasta el control del transporte de iones a través de la membrana celular, promoviendo la síntesis de proteínas, la trascripción de genes y la proliferación celular. La insulina regula el metabolismo de la glucosa y de los lípidos, incrementa la captura de glucosa en músculo y grasa e inhibe la producción de glucosa hepática. La acción de la insulina sobre el hepatocito conduce a la reducción en la expresión de genes claves que codifican las enzimas responsables de la gluconeogénesis. Existen numerosos factores que interfieren con el mecanismo de acción de la insulina que pueden conducir al desarrollo de insulino resistencia.

La Glucosa se forma a partir de la digestión de carbohidratos y la conversión hepática de glucógeno en glucosa. Las hormonas que regulan de manera directa la glicemia son el Glucagón y la Insulina. Para que la glucosa se introduzca en las células se necesita de la insulina y de receptores insulínicos. La insulina se adhiere a los receptores en la superficie de las células blanco, como en la grasa y el músculo.

La Tolerancia a la Sobrecarga Oral de Glucosa, es una prueba que mide la capacidad para metabolizar la glucosa. Las personas que padecen de Diabetes Mellitus tienen altos niveles de glucosa en la sangre y las pruebas de tolerancia a la glucosa son una de las herramientas para diagnosticarla.

Este examen también se realiza para diagnosticar Diabetes Mellitus en estudios investigativos que involucren a los diabéticos y en casos en los que se sospeche la presencia de esta enfermedad, a pesar de haber realizado un examen en ayunas de glucosa en sangre, con resultados normales, así como para el diagnóstico de hiperinsulinismo (elevación de los niveles de insulina).

Los métodos más utilizados comúnmente para evaluar la tolerancia a una sobrecarga de glucosa pueden ser:

• Pruebas de tolerancia utilizando una dosis única oral de glucosa.
  
• Pruebas de tolerancia con una dosis intravenosa de glucosa.

La prueba más común de tolerancia a la glucosa es la oral. Después de una noche de ayuno, el paciente ingiere una solución que contiene una cantidad de glucosa. Se toma una muestra de sangre basal, antes de que el paciente ingiera la solución de glucosa y de nuevo cada treinta minutos después, hasta cumplir dos o tres horas, según la solicitud del médico, para la determinación de la glicemia. Además, el paciente no debe comer durante la realización de la prueba y se recomienda informar al médico acerca del uso de medicamentos, ya que estos podrían afectar los resultados de los exámenes definitivos.

La tolerancia a la glucosa suministrada por vía oral, mide el balance entre la velocidad de pasaje de la glucosa al fluido extracelular y su separación por la asimilación celular y la excreción urinaria, si la hubiere. Por tanto la prueba puede influirse no sólo por aquellos factores vinculados con la utilización de la glucosa, sino también por los que influyen en su absorción.

DESARROLLO

La insulina (Latín insula, "isla") es una hormona polipeptídica formada por 51,5 aminoácidos. Es segregada por las células beta de los islotes de Langerhans del páncreas, en forma de precursor inactivo (proinsulina), el cual pasa al aparato de Golgi, donde se modifica, eliminando una parte y uniendo los dos fragmentos restantes mediante puentes disulfuro.

En el interior del páncreas, las células Beta hacen la hormona Insulina. Con cada comida, las células Beta liberan insulina para ayudar al cuerpo a usar o a acumular el azúcar o la glucosa obtenida de los alimentos.

En personas con Diabetes tipo 1, el páncreas no produce más insulina. Las células Beta tienen que ser destruidas. Ellas necesitan disparos de insulina para usar la glucosa de los alimentos.

Personas con Diabetes tipo 2 desarrollan insulina, pero sus cuerpos no responden a ello tan bien como debe ser. Algunas personas con Diabetes tipo 2 necesitan medicación oral para la diabetes o disparos de insulina para ayudar a sus cuerpos a utilizar la glucosa para el consumo de energía.

La insulina no puede ser tomada como una píldora o pastilla. Ello produciría su destrucción durante la digestión exactamente como las proteínas en los alimentos. La Insulina debe ser inyectada en el tejido celular subcutáneo, bajo la piel, para que de ahí siga al interior de la sangre.
Hay más de 20 tipos de Insulina que se despachan en los EEUU. Estas insulinas difieren entre sí en cómo están hechas, cómo trabajan en el cuerpo, y su precio. La insulina es de origen animal (el cerdo o la vaca) o es producida en los laboratorios para ser exactamente igual a la Insulina humana.

Hay cuatro tipos fundamentales de Insulina, basados en:

• Cuán rápido la insulina empieza su trabajo (arranque)
  
• Cuándo trabaja más fuertemente (hora de su pico)
  
• Cuánto tiempo se mantiene en actividad en su cuerpo (duración).
  

Sin embargo, cada persona responde a la insulina sea hombre o mujer con su propio modelo. Ese es el porqué del arranque, pico de tiempo, y duración son dados como rangos.

La Insulina de acción rápida (Lispro) ingresa a la sangre en los primeros 15 minutos después de la inyección. Su pico se produce más tarde entre 30 y 90 minutos y se puede mantener a lo largo de aproximadamente 5 horas.

La Insulina de acción corta (regular) usualmente ingresa a la sangre en los primeros 30 minutos después de la inyección. Su pico es alcanzado entre 2 y 4 horas más tarde y permanece en la sangre por aproximadamente 4 a 8 horas.

Los valores de referencia oscilan entre: (NORMAL: 2 – 30 uU/ml) en suero.

La glucosa es la principal fuente de energía para el metabolismo celular. Se obtiene fundamentalmente a través de la alimentación, y se almacena principalmente en el hígado, el cual tiene un papel primordial en el mantenimiento de los niveles de glucosa en sangre (glucemia). Para que esos niveles se mantengan y el almacenamiento en el hígado sea adecuado, se precisa la ayuda de la insulina, sustancia producida por el páncreas.

Cuando la insulina es insuficiente, la glucosa se acumula en sangre, y si esta situación se mantiene, da lugar a una serie de complicaciones en distintos órganos. Esta es la razón principal por la que se produce aumento de glucosa en sangre, pero hay otras enfermedades y alteraciones que también la provocan.

Por tanto, la determinación de glucosa en sangre (glucemia) es útil para el diagnóstico de numerosas enfermedades metabólicas, fundamentalmente de la diabetes mellitus. También es necesaria esta prueba, una vez diagnosticada la diabetes, para controlar la dosis de insulina que se debe administrar para tratarla.

La determinación de glucosa en orina (glucosuria), suele formar parte del análisis de orina rutinario. En condiciones normales, no debería haber glucosa en la orina, pero cuando la cantidad en sangre supera un determinado límite, empieza a ser eliminada a través del riñón con la orina.
Cuanta más cantidad de glucosa haya en la sangre, más se eliminará por la orina. La determinación en orina es menos exacta y menos útil que la determinación en sangre.

GLICEMIA EN AYUNO

El metabolismo de la glucosa puede ser anormal por la incapacidad de las células pancreáticas para producir la insulina, por un número reducido de receptores insulínicos, por la absorción inadecuada de glucosa intestinal, por la incapacidad del hígado para metabolizar el glucógeno o por la alteración en el nivel de las hormonas que tienen determinada función en el metabolismo de la glucosa.

Si se sospecha de Diabetes una prueba pos-prandial, ayudará a confirmar el diagnóstico. A veces otros trastornos producen niveles elevados de glucosa en sangre; por lo tanto, deben realizarse una historia amplia, un examen físico y una preparación antes que pueda establecerse un diagnóstico definitivo.

Los valores de referncia en suero: 70 - 110 mg/dl

PRUEBA POST-PRANDIAL DE DOS HORAS

Es una prueba que mide la glucosa plasmática de dos horas después de que el paciente consume algún alimento que contenga aproximadamente 100 g de carbohidratos, o solución glucosada. La ingestión de alimentos se utiliza como prueba de provocación para elevar la cifra de glicemia. Los sujetos normales segregan insulina inmediatamente después de una comida en respuesta a la subida de glicemia, lo que hace que la cifra de glicemia vuelva al rango previo ante de las dos horas después de la comida. Los pacientes diabéticos permanecen con los niveles de glucosa elevado, luego de las dos horas de haber ingerido algún tipo de alimento.

Si los resultados que arroja esta prueba son normales, se puede realizar la prueba de la tolerancia a glucosa oral para confirmar el diagnóstico.

Sin embargo, hay ciertos factores que son determinantes o que interfieren a la hora de realizar esta prueba, tales factores son los siguientes:

• Evitar los ejercicios violentos.
  
• Evitar el Estrés, pues los niveles de glucosa se alteran.
  
• El cigarrillo también altera los valores de glucosa, por lo tanto el fumar cigarrillos es un factor que altera sus niveles.
  
• Los vómitos, mascar chiclets durante la evaluación invalida la prueba.

El paciente debe respetar ciertas condiciones para que se pueda realizar dicha prueba, a continuación se exige:

• Que el paciente debe estar en ayunas de diez a doce horas, antes de la prueba.
  
• Se debe tomar una muestra de sangre en ayunas, es indispensable.
  
• Debe ingerir alimentos como: cereal con leche, jugo de naranja, entre otros, o tomar la solución glucosada simplemente.
  
• Luego de dos horas se debe tomar nuevamente la muestra de sangre.

PRUEBA DE LA TOLERANCIA A LA GLUCOSA ORAL

Esta prueba evalúa la capacidad del paciente para tolerar una carga de glucosa estándar, obteniéndolas muestras de sangre y orina para determinar los niveles de azúcar antes de la sobrecarga y después de una hora, dos horas, tres horas y a veces cuatro o cinco horas. Los pacientes con una propuesta de insulina apropiada pueden tolerar la dosis de glucosa con bastante facilidad y sólo presentan un mínimo aumento transitorio de la glucosa en la hora siguiente a la ingestión. En los sujetos normales la glucosa no pasará a la orina.

La tolerancia a la glucosa suministrada por vía oral mide el balance entre:

• La velocidad del pasaje de la glucosa al fluido extracelular.
  
• Su separación por la asimilación celula.
  
• La excreción urinaria si la hubiere.

Los criterios utilizados para definir la condición de anormalidad de una prueba de tolerancia a la glucosa oral se basa en el nivel o pico elevado alcanzado por la glicemia a los 60 minutos, y la falta de retorno al nivel normal de dos horas después de la ingestión siendo esto último más importantes.

Esta es una prueba programada; la prueba de dos horas se realiza para detectar diabetes, pero tiene excepción en las mujeres embarazadas, la prueba de las tres horas se practica en las embarazadas (para detectar diabetes gestacional) y la de cinco horas ayuda a valorar la posible hipoglucemia.

Sin embargo existen indicaciones para realizar la PTGO (prueba de la tolerancia a la glucosa oral), esta se debe realizar especialmente en individuos con:

• Obesidad.
  
• Antecedentes familiares de diabetes.
  
• Antecedentes de infecciones recurrentes.
  
• Antecedentes de partos con producto macrósomicos.
  
• Episodios inexplicables de hipoglucemia.
  
• Glucosuria transitoria o hiperglucemias durante el embarazo, cirugía, traumatismo, tensión y otros.
  
  

A la hora de realizar la prueba hay unas reglas o condiciones que el paciente debe cumplir para que los resultados puedan llegar a ser confiables, tales condiciones se mencionan a continuación:

• Una dieta adecuada de tres días, antes de realizar la prueba.


• Suspender cualquier tratamiento a base de drogas, anticonceptivos orales, diuréticos, etc, que pueda afectar la prueba.
  
• Guardar un período de inanición de diez a doce horas, antes de realizar la prueba.


• No fumar o tomar café, pues interfiere en los resultados. Tomar agua no afecta esta evaluación.


• No realizar ejercicios extenuantes, y debe estar relajado por lo menos treinta minutos antes de realizar la prueba.


• Extraer la muestra de sangre en completo ayuno.


• Tomar la solución de glucosa: 75 g para adultos, 100 g para embarazadas. Solo se permiten 5 minutos para la ingestión.


• Extraer muestra de sangre a la primera, segunda y tercera hora después de la ingestión de la solución glucosada


• También es necesario e importante obtener muestras de orina en cada hora, así como en la obtención de las muestras de sangre.
  

Ciertamente la PTGO se puede modificar por diversos factores:

• El tabaco, eleva los valores de glucemia.
  
• Ejercicio intenso o reposo excesivo.


• El ayuno no debe ser menor de 10 horas, ni mayor de 12 horas.
  
• Evitar la ansiedad o el estrés.
  
• Enfermedades hepáticas, de tiroides, etc.
  
• Se prefiere usar plasma o suero.
  
• Entre otras.

Hay ciertos criterios que se deben tener en cuenta a la hora del diagnóstico de la Diabetes:

• Síntomas de diabetes y determinación ocasional de una concentración de glucosa en sangre igual o mayor a 200 mg/dL. Los síntomas clásicos de diabetes son los siguientes: Poliuria, Polidipsia y pérdida de peso inexplicable.


• Glucosa en sangre en ayunas igual o mayor a 126 mg/dL.
  
• Glucosa en sangre a las 2 horas igual o mayor a 200 mg/dL durante una prueba de tolerancia a la glucosa oral.
  

HEMOGLOBINA GLUCOSILADA (Hb1AC)

Esta glucohemoglobina es un tipo normal de hemoglobina, que no es más que glucosa sanguínea adherida a la hemoglobina. La cantidad de hemoglobina glucosilada unida a los eritrocitos es directamente proporcional a la cantidad de glucosa disponible durante la vida del eritrocito (120 días).

DETERMINACIÓN DE LABORATORIO.

FUNDAMENTO DEL PRINCIPIO DE LA PTGO (Prueba de Tolerancia a la Glucosa Oral), Método de WINNER:

La glucosa es oxidada enzimáticamente por la glucosa-oxidasa, produciendo Ácido Glucónico y agua oxigenada, esta última oxida al cromógeno en presencia de peroxidasa produciendo un compuesto de color rosado, cuya intensidad es proporcional a la concentración de glucosa en la muestra analizada.

PROCEDIMIENTO

El paciente a las 8:15 am se toma ua muestra basal en ayuno, la cual se centrifuga imnedaiatamente despues de ser coagulada.

Se toma enseguida después de haber tomado la muestras basal en ayuno 75 gr de la solución glucosada llamada Glicolax.

Luego en la proxima hora a las 9:15 am se le vuelve a tomar otra muestra de sangre; esta seria la primera hora.

Y a la segunda hora que son las 10:15 am se toma la última muestra. Esta seria pare determinar glucosa post-pandrial.

Tambien para evaluar el funcionamiento de la glucosa y realizar la curva de tolerancia a la glucosa oral.

TÉCNICA.



Muestra: suero del paciente




Se agrego:

1 ml de reactivo

10 ul de muestra.

Se incubo por 10 min a temperatura ambiente (37 C) y se lee a 510 nm.

Este fue el método a seguir con todas la muestras, de 1, 2 y 3 horas. Para realizar la curva de tolerancia a la glucosa oral.

Se realizo un blanco reactivo: con 1ml de reactivo + 10 ul de agua destilada; para calibrar el aparato.

Y un estandar que llevaba: 1 ml de ractivo + 10 ul de estandar.

Datos del Px.

Nombre y Apellido: Yelifer Garcia
Edad: 20 a.
Sexo: femenino.


RESULTADOS DE LABORATORIO:




Glicemia basal (0 hora): 100 mg/dl
Primera hora: 108 mg/dl
Segunda hora: 96 mg/dl
Concentración de estándard: 100 mg/dl

CONCLUSION.

Los valores dieron entre el rango de referencia. Aunque la glucosa en ayuna dio un poca alta en relación a los resultados que se esperaban; pero hubo un factor importante y fue que la muestra se hemolizo.

Debido a que según la A.D.A los valores en ayuna deben dar menor de 126 gr/dl, a la primera hora menor de 180 gr/dl y a las 2 horas que es la más importante que es la que evalua la PTGO debe dar menor de 140 gr/dl.

BIBLIOGRAFIA

Kaplan, L. y Pesce, A. (1986). QUÍMICA CLÍNICA. Panamericana: Buenos Aires.

Ángel, G.(2007). INTERPRETACIÓN CLÍNICA DE LABORATORIO.7°ma Edición. Panamericana: Bogotá.

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www.saludalia.com/docs/Salud/web_saludalia/pruebas_diagnosticas/doc/doc_glucosa.htm -

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www.lebbyac.com/manual/Procedimientos_tecnicos/valorderef.htm - 81k -

Determinacion de LDH, Funcionamiento Cardiaco

UNIVERSIDAD DE ORIENTE.
NÚCLEO BOLIVAR.
DEPARTAMENTO DE BIOANÁLISIS.
CÁTEDRA: Laboratorio De Bioquímica Clínica.

PERFIL ENZIMATICO.

PARA DETERMINACION DE AFECCIONES AL MIOCARDIO.

DETERMINACION DE DLH.

Prof: German Guzman

Bachiller: Yelifer Garcia 17.591.715.

Cuidad Bolivar, Junio del 2008.

INDICE.

Introduccion.....................................................................3

Desarrollo.........................................................................4

Corazón.............................................................................4

LDH....................................................................................5

Causas de niveles elevados de DLH.....................................6

Variantes de las isoenzimas..............................................7

Niveles disminuidos de LDH.............................................7

Determinación de laboratorio..............................................7

Método...................................................................................7

Fundamento del método.......................................................7

Técnica...................................................................................8

Resultados..............................................................................8

Conclusiones.........................................................................8

Bibliografía...........................................................................9

INTRODUCCION.

En el tratamiento actual de los síndromes coronarios agudos, el tiempo es uno de los factores primordiales para obtener resultados óptimos, es por esto, que se han diseñado pruebas cualitativas para determinar la presencia o no de marcadores séricos de daño miocárdio. Estas pruebas son realizadas generalmente por la enfermera y por lo tanto es imprescindible que conozca el procedimiento correcto para la realización de estas pruebas.

La utilización de los métodos diagnósticos a la cabecera del paciente para la medición cualitativa de enzimas cardíacas en pacientes con síndromes coronarios agudos, permite al personal de salud adelantarse y planificar intervenciones con mayor exactitud y precisión.

Sobre todo en la enfermedad cardiovascular, la cual sigue ocupando una de las principales causas de muerte en muchos países repercutiendo como una gran carga emocional y económica para el país.

Varias enzimas cardiacas son de importancia clínica debido a que la detección de su liberación en el torrente sanguíneo proporciona un indicio sensible y especifico de lesión y muerte de las células miocárdicas. Cuando muere la célula cardiaca se libera una gran cantidad de estas enzimas y su nivel puede ser determinado en la sangre.

Estas enzimas para que revistan importancia deben ser solubles y persistir en la circulación un tiempo suficientemente largo como para poder ser detectadas. La rata de liberación sigue un patrón temporal que tiene valor diagnostico. Actualmente la determinación de tres enzimas séricas permiten hacer el diagnostico enzimático de infarto al miocardio en su forma aguda: la creatin fosfoquinasa (CK o CPK) y su isoenzima banda miocárdica (MB) , la deshidrogenasa láctica (LDH) y la transaminasa oxalacética (SGOT).

En este caso vamos a determinar la LDH.

La LDH es una enzima, localizada exclusivamente en el citoplasma de la célula, que transfiere H+ (deshidrogenasa) y cataliza la oxidación reversible de L-lactato a piruvato.

Tiene un PM de 140000 daltons. Sus isoenzimas conocidas son: LD1, LD2, LD3, LD4, LD5.

DESARROLLO.

El corazón (de un derivado popular del latín cor, cordis) es el órgano principal del aparato circulatorio. Es un músculo estriado hueco, una bomba aspirante e impelente, que aspira desde las aurículas la sangre que circula por las venas, y la impulsa desde los ventrículos hacia las arterias. Entre estos dos se encuentra una válvula que hace que la dirección de la circulacion sea la adecuada. El término cardíaco hace referencia al corazón en idioma griego καρδια kardia.

El corazón es un órgano muscular hueco cuya función es de bombear la sangre a través de los vasos sanguíneos del organismo. Se sitúa en el mediastino anterior en donde está rodeado por una membrana fibrosa gruesa llamada pericardio. Esta envuelto laxamente por el saco pericárdico que es un saco seroso de doble pared que encierra al corazón.

El pericardio está formado por una capa Fibrosa y una capa Serosa. La fibrosa está formada por tejido conectivo y adiposo. La capa serosa del pericardio interior secreta líquido pericárdico que lubrica la superficie del corazón, para aislarlo y evitar la fricción mecánica que sufre durante la contracción. Las capas fibrosas externas lo protegen y separan.

El corazón se compone de tres tipos de músculo cardiaco principalmente:

Músculo auricular
Músculo ventricular
Fibras musculares excitadoras y conductoras especializadas

Estructura del corazón

De dentro a fuera el corazón presenta las siguientes capas:

• El endocardio, una membrana serosa de endotelio y tejido conectivo de revestimiento interno, con la cual entra en contacto la sangre. Incluye fibras elásticas y de colágena, vasos sanguíneos y fibras musculares especializadas. En su estructura encontramos las trabéculas carnosas, que dan resistencia para aumentar la contracción del corazón.
  
• El miocardio, el músculo cardíaco propiamente dicho; encargado de impulsar la sangre por el cuerpo mediante su contracción. Encontramos también en esta capa tejido conectivo, capilares, capilares linfáticos y fibras nerviosas.
  
• El epicardio, es una capa fina serosa mesotelial que envuelve al corazón llevando consigo capilares y fibras nerviosas. Esta capa se considera parte del pericardio seroso.

LD izoenzimas de la deshidrogenasa láctica. Este es un examen que mide la cantidad de las isoenzimas (diferentes formas) de lactato deshidrogenasa (LDH) en el suero de la sangre.
Razones por las que se realiza el examen:

Este examen se realiza generalmente cuando se sospecha que existen niveles de LDH elevados. La medición de estas isoenzimas ayuda a determinar la ubicación del daño tisular.

Este enzima está compuesto por 4 cadenas polipeptídicas de dos tipos: H y M. Las estructuras de LD-H y LD-M están determinadas por los loci situados en los cromosomas 12 y 11, respectivamente. La subunidad M, se encuentra principalmente en el músculo – esquelético (“Muscle”) e hígado. La subunidad H, se encuentra principalmente en el corazón (“Heart”).

La enzima LDH se encuentra en muchos tejidos del cuerpo, como el corazón, en el hígado, en los riñones, en el músculo esquelético, en el cerebro, en las células sanguíneas y en los pulmones, y es muy importante para el metabolismo. Si llega a resultar daño en algunos de estos tejidos aumentara sus niveles séricos de LDH.

La LDH se presenta en 5 formas llamadas isoenzimas que difieren ligeramente en su estructura. La LDH-1 se encuentra principalmente en el músculo cardíaco y en los glóbulos rojos; la LDH-2 se concentra en los glóbulos blancos; la LDH-3 es más alta en los pulmones; la LDH-4 es más alta en los riñones, en la placenta y en el páncreas; y la LDH-5 es más alta en el hígado y en el músculo esquelético. Todas estas isoenzimas se pueden medir en la sangre.

Significado de los resultados anormales : Debido a que la LDH se encuentra en muchos tejidos del organismo, la LDH total no es específica para enfermedad cardiaca. Normalmente, la concentración de LDH-2 es mayor que la de LDH-1; sin embargo, después de un ataque cardíaco, la concentración de LDH-1 es generalmente mayor que la de LDH-2 (a esto se le denomina patrón de LDH “descontrolado”). Por otro lado, el nivel de LDH aumenta entre las 12 y 24 horas subsiguientes al ataque cardíaco, alcanza su pico máximo en 48 a 72 horas y se normaliza en más o menos 7 días.

Los niveles de la isoenzima LDH superiores al normal pueden verse en caso de:

• Ataque cardíaco
• Daño renal.
• Anemia hemolítica.
• Hipotensión.
• Mononucleosis infecciosa.
• Isquemia intestinal (deficiencia sanguínea) e infarto (muerte tisular).
• Enfermedad hepática (como la hepatitis).
• Lesión muscular.
• Distrofia muscular.
• Pancreatitis.
• Infarto pulmonar (muerte tisular).
• Apoplejía.
• Cardiomiopatía isquémica.

Su elevación suele indicar muerte celular y fuga de la enzima de la célula.

Aunque la elevación es inespecífica, esta prueba es útil para confirmar infarto al miocardio o pulmonar cuando se combinan otros datos. Por ejemplo, la LDH permanece levada durante un tiempo más prolongado que la CK en el infarto al miocardio.

También es útil en el diagnostico diferencial de distrofia muscular y anemia perniciosa. Sin embargo, se pueden obtener más datos específicos clasificados de la LDH en sus cinco isoenzimas.

La LDH también es útil como marcador tumoral en el seminoma o tumor de células germinativas, especialmente cuando en este tumor no se produce AFP ni gonadotropina coriónica humana.


Las distintas variantes o isoenzimas de la enzima tienen aplicación en lesiones de los distintos órganos.

• Corazón: LDH1, LDH2.



• Pulmones: LDH3.



• Hígado y músculos: LDH4, LDH5.

El test es más útil cuando se aíslan las formas LDH1 y LDH2.

Valores normales:

LDH1 entre 18.1 y el 29 % del total

LDH2 entre 29.4 y el 37.5% del total

LDH3 entre 18.8 y el 26 % del total

LDH4 entre 9.2 y el 16.5% del total

LDH5 entre 5.3 y el 13.4% del total

Valores aumentados pueden indicar infarto de miocardio.

Situaciones que pueden alterar los resultados: embarazo; cirugía reciente; prótesis valvular cardíaca.

VALORES DISMINUIDO:
Lipemia. Oxalato, detergentes.
Salicilato, ácido ascórbico, teofilina. Clofibrate.

DETERMINACIÓN DE LABORATORIO.



MÉTODO.

FUNDAMENTO:

La enzima LDH cataliza la reacción reversible de lactato a piruvato, pudiendo utilizarse ambos como sustratos. Este reactivo se basa en el método de Wacker & Amador, y las modificaciones posteriores de Gay, Mc. Comb y Bowers, tendientes a mejorar la linealidad del método y la duración del reactivo.

L-Lactato + NAD + ________LDH___________ Piruvato + H +

En este caso la enzima cataliza la oxidación de lactato a piruvato reduciendo el NAD a NADH. La concentración de LDH se determina midiendo el aumento de Absorbancia a 340nm. A medida que se produce NADH.

TECNICA.

Lleva el reactivo a temperatura de reacción 30 a 37 ªC

Reactivo reconstituido………………………………. 1 ml
Volumen de la muestra………………………………. 0,05 ml

Mezcla bien y trasferir a la cubeta del espectrofotómetro. Se incuba 30 seg a temperatura de reacción.
Lee abs inicial a 340nm, repetir a intervalos de 60 seg por 3 min.


PACIENTE: Fanny Rodríguez.
EDAD: 23 a.
SEXO: Femenino.

Muestra utilizada: suero


RESULTADOS LDH:………………………… 175 U/L


VALORES DE REFERNCIA
(37ªC )…… 115 a 240


CONCLUSION.

La paciente Fanny Rodríguez tiene los valores de LDH entre los valores normales, lo que no indica ninguna alteración a nivel de los tejido de la cual actúa esta enzima.

BIBLIOGRAFIA.

1. Guía de laboratorio de bioquímica clínica de perfil enzimático para valoración del infarto agudo al miocardio. 7ª semestre escuela de cs. De la salud. Udo bolívar
2. Inserto VALTEK DIAGNOSTICS de lactato deshidrogenasa. Santiago – Chile
3. www.buenasalud.com/lib/showdoc.cfm?libdocid=3545&returncatid=1914 - 26k
4. www.scribd.com/doc/2235986/QUIMICA-CLINICA-ENZIMAS-CARDIACAS-II-B-LDH - 257k
5. es.wikipedia.org/wiki/Corazón - 54k –
6. http://www.medigraphic.com/espanol/e-htms/e-enfe/e-en2002/e-en02-2/em-en022f.htm
   
   

analisis general de orina

UNIVERSIDAD DE ORIENTE.
NÚCLEO BOLIVAR.
DEPARTAMENTO DE BIOANÁLISIS.
CÁTEDRA: Laboratorio De Bioquímica Clínica.

ANALISIS GENERAL DE ORINA

Prof: German Guzman

Bachiller:

Yelifer Garcia 17.591.715

Ysabel Maneiro 16.010.531

Tobianny Martinez 17.242.950

Cuidad Bolivar, junio del 2008.

INDICE.

Introducción………………………………………………………………………... 3
Desarrollo.………………………………………………………………………….. 4
Principales constituyentes de la orina………….………………………… 4
Análisis general de orina………………………………………………………. 5
Causas de factores erróneos en el análisis.……….………………..….. 6
Examen físico……………...…………………………………………………….… 7
Determinación de laboratorio……………………………………….…………. 9
Pruebas cualitativas…………..………………………………………………….. 10
Conclusiones………………………………………....…………………………… 11
Bibliografía………………………………………………………………………….. 12

INTRODUCCION.

El examen general de orina (EGO) es una prueba de gran importancia para el clínico y para el paciente mismo, sin embargo esta área, al igual que la del coprologico, son vistas con cierto recelo, esto se debe al tipo de muestra que en ellas se analizan. Para algunos químicos, no pasa de ser una simple rutina engorrosa, donde lo único que se puede realizar es la lectura de tiras y la vista al microscopio, pero el uroanálisis es algo más que la simple impregnación de la tira y la observación del sedimento, es la aplicación de todos nuestros conocimientos y el empleo de todos nuestros recursos dentro del laboratorio para proporcionar al médico y al paciente resultados de y con calidad

Este trabajo no pretende abarcar todas las pruebas alternativas, solamente aquellas que debido a su importancia es preciso confirmar o descartar por un método más especifico, así mismo, se piensa que los reactivos aquí empleados se tienen en todos los laboratorios. Claro que en cada laboratorio se pueden implementar otras técnicas de acuerdo a sus recursos y necesidades.

La orina representa el medio más importante para eliminar las sustancias no volátiles del cuerpo, y su composición cualitativa y cuantitativa es una expresión de la compleja actividad funcional del riñón. De aquí la importancia de su análisis en la exploración funcional del mismo. Así, en muchos casos es el resultado obtenido en un examen rutinario de orina el que revela la existencia de una neuropatía latente o una enfermedad en que el trastorno no es propiamente renal, pero determina cambios en la composición urinaria.

El estudio del sedimento urinario es un método diagnostico muy simple en esta época sin embargo, este representa un medio diagnostico auxiliar muy valioso, no solo por su sencillez, sino también por su rentabilidad. El sedimento urinario solo aporta información al médico que tiene cierta experiencia en relacionar el cuadro clínico con los datos del sedimento.

El análisis de orina realizado en el laboratorio clínico, puede proporcionar una información amplia, variada y útil del riñón de un individuo y de las enfermedades sistémicas que pueden afectar este órgano excretor. Por medio de este análisis, es posible elucidar tanto desórdenes estructurales (anatómicos) como desórdenes funcionales (fisiológicos) del riñón y del tracto urinario inferior, sus causas, y su pronóstico. La realización cuidadosa del examen de orina, por parte del laboratorio, ayuda al diagnóstico diferencial de numerosas enfermedades del sistema urinario.

Usualmente, los datos de laboratorio obtenidos por medio de este análisis, se logran sin dolor, daño o tensión para el paciente. Esta es la razón por la cual, la realización e interpretación correcta del análisis de orina, por parte del laboratorio permanecerá siempre como una herramienta esencial más no definitiva de la práctica clínica.

DESARROLLO.

Los riñones son órganos pares situados en la pared posterior del abdomen a ambos lados de la columna vertebral. Debajo de la cápsula de tejido fibroso que incluye los riñones se ubica la corteza, que contiene los glomérulos.

La porción interna del riñón, la médula, contiene los tubos colectores. La pelvis renal disminuye rápidamente su calibre y se une dentro del uréter. Cada uréter desciende al abdomen al costado de la columna vertebral para unirse en la vejiga. La vejiga provee un almacenamiento temporal de orina, que es eventualmente vertida a través de la uretra al exterior.

El riñón es el principal regulador de todos los fluidos corporales y es primariamente responsable de mantener la homeostasis, o equilibrio entre fluido y electrolitos en el organismo.

El riñón tiene seis funciones principales:

1. Formación de la orina
2. Regulación del equilibrio hidroelectrolítico
3. Regulación del equilibrio ácido-base
4. Excreción de los productos de desecho del metabolismo proteico
5. Función hormonal
6. Conservación proteica.

El riñón es capaz de efectuar estas funciones complejas porque aproximadamente el 25% del volumen de sangre bombeado por el corazón en la circulación sistémica circula a través de los riñones; por lo tanto los riñones, que constituyen cerca del 0.5% del peso total del cuerpo, reciben un cuarto de la salida cardíaca.


Los riñones también son los responsables de filtrar toxinas, desechos, agua ingerida y sales minerales fuera de la corriente sanguínea.

Principales constituyentes de la orina.

Constituyente Valor

Albúmina <15-30>
Calcio 100-240 mg/24h
Creatinina 1.2-1.8 mg/24h
Glucosa <300
Cetonas <50
Osmolaridad >600 mOsm/l
Fósforo 0.9-1.3 g/24h
Potasio 30-100 mEq/24h
pH 4.7-7.8
Sodio 85-250 mEq/24h
Gravedad específica 1.005-1.030
Bilirrubina total No detectada
Proteinas totales <150
Nitrógeno ureico 7-16 g/24h
Acido úrico 300-800 mg/24h

Urobilinógeno <1>

En la actualidad, se practican tres tipos de exámenes de orina: análisis de orina por tira húmeda, empleado generalmente por los médicos en sus consultorios y por los pacientes en sus casas; tamizaje de análisis húmedo de la orina, comúnmente llamado análisis básico o rutinario de orina; y citodiagnóstico de la orina, que es una evaluación citológica especializada del sedimento urinario que correlaciona con los análisis realizados por medio de la tira reactiva.

El análisis de orina realizado con la tira húmeda es un ensayo de primera etapa para la detección y monitoreo de pacientes con anormalidades químicas. Los pacientes diabéticos a menudo monitorean permanentemente su propia enfermedad, buscando signos de glucosuria, proteinuria, e infecciones del tracto urinario, mediante pruebas realizadas en casa.

El análisis de orina húmedo o rutinario, proporciona, a costos razonables, un tamizaje adecuado para la detección de anormalidades químicas y morfológicas presentes en la orina. Este procedimiento se compone de dos partes:

1. Un análisis macroscópico, en el cual se determinan las características fisicoquímicas (apariencia, gravedad específica y la medición de los constituyentes químicos por medio de la tira), y

2. Un examen microscópico del sedimento, en campo claro o contraste de fases, para verificar hematuria, piuria, cilindruria, cristaluria, y otros signos. Por medio de este simple examen de orina, un uromicroscopista experimentado puede detectar y monitorear muchas entidades que afectan al riñón y al tracto urinario inferior.

El análisis general de orina comprende:

• Físico: aspecto, color, olor, densidad, y volumen
  

• Químico: pH, glucosa, proteínas, cetonas, bilirrubina, urobilinogeno, sangre, hamoglobina.
  

• Macroscópico:
  Células: epiteliales, redondas o renales y de transición.
  Eritrocitos.
  Leucocitos.
  Cilindros: hialinos, leucocitarios, eritrocitarios, otros.
  Cristales en orinas acidas y alcalinas
  Parásitos.

Causas de Fuentes de errores al momento de analizar la muestra:

1.- Si se tiene secreciones vaginales como flujo abundante o secreciones menstruales, se debe posponer la toma de muestra o usar sondas para evitar se contamine la muestra.


2.- La muestra se debe refrigerar dentro de la primera hora después de recogida la muestra si no se va a procesar en el momento, porque puede producir los siguientes cambios en su composición:

a.) Las bacterias de la orina desdoblan la urea, convirtiéndola en amoniaco, con lo que se alcaliniza la orina

b.) Los cilindros urinarios que suelen descomponerse después de varias horas

b.) Los eritrocitos son alisados por las orinas hipotónicas.

3.- Un pH demasiado alto o demasiado bajo altera los componentes celulares.

4.- La temperatura de la muestra modifica la densidad específica, las muestras frías producen cifras elevadas altas.

5.- La orinas alcalinas producen lecturas bajas únicamente con tiras reactivas y los residuos de detergente en los recipientes donde se recolecto la orina producen una densidad especifica elevada de la muestra.

6.- El aspecto se ve afectado después de ingerir alimentos los uratos y los fosfatos producen turbidez en la orina normal, el semen o las secreciones vaginal mezclado con la orina constituye otra causa de turbidez o cantidades excesivas de grasa o debido a la refrigeración o congelación a temperatura ambiental debido a que los cristales se precipitan.

7.- la orina de color normal se oscurece si se deja reposar debido a la oxidación del urobilinogeno a urobilina, esta descomposición se inicia 30 min después de la micción

Examen físico:

Solo informa sobre la apariencia y el olor de la muestra de orina cuando es anormal. Debido a que los recién nacidos y los ancianos tienden a tener menor habilidad para concentrar la orina, es común que esta sea mas pálida de lo normal


Aspecto

NORMAL

◘La orina reciente debe ser transparente a ligeramente turbia.

SIGNIFICADO CLÍNICO

◘La orina patológica suele ser turbia
◘La turbidez se presenta como resultado de infecciones urinarias
◘La orina también se enturbia por la presencia de eritrocitos, leucocitos y bacterias.

INTERFERENCIAS:

◘Ingesta de alimentos, los uratos o fosfatos producen turbidez en la orina normal
◘Semen o secreción vaginal
◘La turbidez grasosa se produce por la presencia de grasa.
◘ La orina normal suele enturbiarse después de ser refrigerada o conservarse a temperatura ambiental debido a que precipitan los cristales.

Olor

La orina recien emitida tiene un olor característico debido a la presencia de ácidos volátiles. No suele ser desagradable.

COLOR

NORMALMENTE:

◘Claro, casi como agua,en las orinas diluidas después de bebidas copiosas.
◘Amarillo como paja
◘Ámbar




DETERMINACION DE LABORATORIO

Paciente: Yosdelsy
Sexo: Femenino
Edad: 25 a

EXAMEN FISICO Y MACROSCOPICO DE LA ORINA.

Examen físico:

- Aspecto: limpio claro
- Color: amarillo pálido

Examen Químico:

- Bilirrubina: negativo (-)
- Urobilinogeno: negativo (-)
- Cetonas: negativo (-)
- Glucosa: negativo(-)
- Proteínas: trazas
- Sangre: negativo (-)
- Nitrato: positivo (+)
- pH: 5
- Densidad : 1,030
- Leucocitos: negativos (-)


Examen microscópico:

-Leucocitos 5 -10 x campo
-Hematíes: 0 x campo
-Bacterias: escasas
-Cristales: oxalatos de calcio 0-1 x campo
-Células epiteliales:

Pruebas cualitativas para detectar proteinuria

Prueba de Acido Sulfosalicílico:

Es un método cualitativo que detecta cualquier tipo de proteína urinaria mediante precipitación del ácido. Se reporta sin turbidez, ligeramente turbio, turbio, muy turbio.

En este paciente no hubo turbidez. Por lo tanto se confirmo la ausencia de proteínas en la orina.

Técnica
3 ml de Orina.
1 ml de Acido sulfosalicilico.

Como reportarlo.

No existe turbidez (negativo -)
Se percibe turbidez sólo sobre fondo negro (trazas)
Se observa turbidez pero no granular (+)
Se observa turbidez y es granular (++)
Turbidez considerable y existe aglutinación (+++)
Nube densa con masas aglutinadas de gran tamaño que pueden solidificarse(++++)



Conclusiones :

• El ácido sulfosalicilico nos dio negativo, no hubo turbidez.


• Se encontraron bacterias escasas y se puede deber a una infeccion debido a que los nitratos estaban positivos (+).


• Tambien se observaron cristales de oxalato de calcio, eso se puede deber a litiasis renal, problemas reumatoides, en pacientes diabeticos tambien se pueden observar entre otras patologias. Pero para hacer un diagnostico definitivo se deben realizar otars pruebas complementarias, por lo tanto no se reporta ninguna patologias debido a que los cristales eran muy escasos.

En conclusion el paciente lo que presenta es una pequeña infeccion, por presentar bacterias y leucositos en el examen general de orina.

BIBLIOGRAFIA.

http://www.scribd.com/doc/1083692/PRACTICA-EXAMEN-GENERAL-DE-ORINA

http://www.Bases.bireme.br/cgibin/wxislind.exe/iah/online/IsisScript=iah/iah.xis&src=google&base=LILACS