Análisis Seminal.

UNIVERSIDAD DE ORIENTE
NUCLEO BOLIVAR
ESC. CS. DE LA SALUD
DEPARTAMENTO DE BIOANALISIS
ASIGNATURA: LAB. DE BIOQUIMICA CLINICA

ANALISIS SEMINAL









PROFESOR: GERMAN GUZMAN

BACHILLER: Yelifer Garcia 17.591.715

CIUDAD BOLIVAR, JUNIO DE 2008.

INDICE

Introducción………………………………………………………………………... 3
Desarrollo.………………………………………………………………………….. 4
Tabla de valores normales……………………………………………….…… 5
Nomenclatura……..………………………………………………………………. 5
Concentración de espermatozoides……………………………………….. 6
Conteo total de espermatozoides……………...…………………………. 6
Motilidad de los espermatozoides..……………………………….…………… 7
Viabilidad de los espermatozoide………………………………………………. 7
Morfología normal de los espermatozoides.……………………………. 8
Otras células en el semen………...…………………………………………… 9
Características físicas del semen………………………….…………………. 10
Análisis bioquímico del plasma seminal………………………………….… 11
Principales marcadores seminales de la función

de las glandulas accesorias………………………………………………. 12
Análisis de laboratorio.………………………..…….………………….. 13
Conclusiones…………………………………………..……………………… 16
Bibliografía…………………………………………………………………….. 17

INTRODUCCION

Aproximadamente el 50% de las parejas que no han podido tener hijos enfrentan un problema de infertilidad masculina y uno de los primeros exámenes que se realizan para evaluar la fertilidad de los hombres es el análisis de semen.

Mucho se desconoce acerca de la infertilidad masculina y posiblemente los resultados de los exámenes no logren explicar la causa del problema. Si se encuentra un conteo bajo de espermatozoides o un semen anormal, se pueden necesitar exámenes adicionales.

Si bien el recuento de espermatozoides (el número o la densidad de espermatozoides en una muestra) es crítico, hay otros factores como la motilidad de los espermatozoides y su avance hacia adelante que también parecen ser importantes para determinar la capacidad de fertilización de los espermatozoides.

Para los hombres, el examen médico más importante que podría darles un resultado sumamente preciso acerca del estado de su salud reproductiva sería una prueba o análisis de su semen. Incluso en los casos en los que el problema no estuviera ocasionado por la calidad o por las características propias del semen; el hecho de saber qué hay de malo en él.

DESARROLLO

En los últimos años se han logrado avances notables en el conocimiento de los mecanismos de la reproducción humana, así como en los métodos de investigación y diagnóstico de los trastornos de la fertilidad. A pesar de esto, el análisis del semen sigue siendo un examen imprescindible en el estudio del hombre que acude a consulta por infertilidad; luego se realizan otros exámenes según los resultados del mismo.

En la literatura, el análisis del semen o análisis seminal ha recibido distintos nombres, como: espermograma, espermiograma, espermatograma, espermocitograma, espermocinetograma. El término espermograma es uno de los más utilizados en las publicaciones de América Latina, mientras que espermiograma es más utilizado en las provenientes de España, los otros son de uso mucho menos común. Nosotros preferimos utilizar espermograma o simplemente análisis seminal.

Un análisis seminal completo nos informa sobre las propiedades del semen en su conjunto, tanto de la producción de espermatozoides como de la función de las glándulas sexuales accesorias, aspectos que analizaremos a continuación.

Para llegar a conclusiones se recomienda realizar al menos 2 análisis seminales, con no menos de 15 d ni más de 90 d de separación entre ambos, además es recomendable una abstinencia sexual de 3 a 5 d, que nunca debe ser menor de 2 d ni mayor de 7.1-3 Si cualesquiera de los indicadores es normal en uno de los exámenes se considera que ese indicador es normal, pero si está alterado en ambos se concluye como anormal. Si los resultados de estos 2 análisis seminales son marcadamente diferentes debe repetirse un tercer examen antes de hacer conclusiones pues la producción de espermatozoides puede variar considerablemente, tanto en algunos hombres normales como en ciertas circunstancias anormales.1-5

Los indicadores o marcadores utilizados para evaluar la calidad del semen en el espermograma "clásico, estándar o tradicional" son fundamentalmente los siguientes: conteo de espermatozoides por mililitro (concentración o densidad), conteo total de espermatozoides, movilidad, viabilidad y morfología normal de los espermatozoides; también deben evaluar-se otras características físicas del semen como su apariencia, volumen de semen eyaculado, viscosidad o consistencia y pH del semen, así como conteo de células, en especial leucocitos.

Ha de recordarse que existe un grupo elevado de hombres que acuden a consulta por infertilidad y tienen un espermograma estándar normal (48,3 % en nuestra consulta y 49,2 % en el estudio multicéntrico de la OMS), a estos los clasificamos en la categoría diagnóstica de "Causa no demostrable"4,5. Esto nos indica que en ocasiones son necesarios otros elementos que permitan definir mejor la capacidad de fertilización de los espermatozoides.

En la tabla mostramos los criterios de normalidad al examinar una muestra de semen.1,3-6

En la literatura, la nomenclatura usada para describir las distintas alteraciones del espermograma no ha sido uniforme, lo cual con frecuencia confunde al lector no especializado, pues un mismo término se ha utilizado con diferentes acepciones y también, diferentes términos para describir una misma alteración. Por estos motivos la Asociación Internacional de Andrología y el Grupo de Expertos de la OMS han recomendado utilizar una clasificación descriptiva de dichas alteraciones que permita uniformidad y evite confusiones.1,4,5 Esta clasificación descriptiva la iremos analizando en esta revisión, pero a continuación mostramos un resumen.

TABLA. Valores normales de los indicadores del espermograma

Indicadores Valores normales

Volumen eyaculado 1,5 - 6,0 mL
pH del semen 7,2 - 8,0
Concentración espermatozoides/mL 20 000 000
Conteo total de espermatozoides 40 000 000
Movilidad lineal progresiva (a+b) 50 %
Movilidad lineal rápida (a) 25 %
Morfología normal 50 %
- Criterio estricto 30 %
Viabilidad 50 %
Aglutinaciones 10 %

NOMENCLATURA DESCRIPTIVA DE LOS HALLAZGOS DEL ESPERMOGRAMA

- Normozoospermia: Concentración de espermatozoides 20 000 000/mL.

- Oligozoospermia: Concentración de espermatozoides 20 000 000/mL.

- Astenozoospermia: Menos del 50 % de espermatozoides con progregresión lineal (movilidad a+b) o menos del 25 % con progresión rápida (movilidad a).

- Teratozoospermia: Menos del 50 % de espermatozoides con morfología normal.

- Azoospermia: Ausencia de espermatozoides en el eyaculado.

- Aspermia: Ausencia de eyaculado externo.

- Leucocitospermia:Presencia de 1 000 000, de leucocitos/mL.

La interpretación de las características de las distintas cualidades del semen que ofreceremos se basa fundamentalmente en nuestra experiencia, aunque también nos apoyamos en las recomendaciones de la OMS y en las experiencias de otros autores de reconocido prestigio.

CONTEO DE ESPERMATOZOIDES/mL (CONCENTRACIÓN O DENSIDAD)

Las cifras "normales" tomadas de una población general, sin tener en cuenta su fertilidad, han variado a través del tiempo; de la cifra entre 60 y 120 000 000/mL que aparece en libros de texto antiguos se ha llegado al criterio actual de normalidad (normozoospermia), que un comité de expertos de la OMS ha situado en la cifra de 20 000 000/mL o más.1 Sin embargo, en lo referente a cuáles son las cifras "fértiles" la discusión es aún mayor, como veremos más adelante.

Se ha definido como oligozoospermia a la concentración de espermatozoides menor de 20 000 000/mL,1,4,5 a su vez esta puede dividirse en 3 grados:7 a) oligozoospermia ligera: cifras entre 10 y 20 000 000/mL, b) oligozoospermia moderada: concentración entre 5 y 10 000 000/mL y c) oligozoospermia severa cuando el conteo está por debajo de 5 000 000/mL.

La severidad de la oligozoospermia no nos permite conocer la causa del trastorno y en cuanto al pronóstico actualmente sólo es posible afir-mar que cifras inferiores a 5 000 000/mL (oligozoospermia severa) tienen una relación inequívoca con el grado de fertilidad del sujeto en cuestión; por encima de esa cantidad los resultados son variables pues no se ha hallado una relación constante y resulta frecuente observar embarazos con concentraciones entre 10 y 20 000 000/mL.1,2,5,7 Creemos que el límite de 10 000 000/mL expresa cambios de importancia en el epitelio germinal o en el testículo en general, pues por debajo de este límite hemos encontrado elevación de las gonadotropinas (FSH y LH) y disminución de testosterona y dihidrotestosterona en plasma, lo cual no se observa con cifras mayores.8

La azoospermia se define como la ausencia de espermatozoides en el semen e indica un daño severo del epitelio germinal (azoospermia secretora), cuyas causas más comunes son la aplasia germinal o síndrome de sólo células de Sertoli y la detención de la maduración espermática o arresto de la espermatogénesis, también puede deberse a una obstrucción total de las vías seminales (azoospermia obstructiva);1-7,9 el hallazgo de azoospermia en una muestra de semen, ya sea secretora u obstructiva, es siempre de muy mal pronóstico, según nuestra experiencia, prácticamente nunca responde al tratamiento aunque se conozca su causa precisa.10

CONTEO TOTAL DE ESPERMATOZOIDES

El conteo total de espermatozoides suele reflejar el estado de la espermatogénesis, pero también está en relación directa con el volumen eyaculado y con el período de abstinencia sexual previo.1,2,11 Se calcula con una simple operación aritmética de multiplicador la concentración de espermatozoides/mL por el volumen eyaculado. En la actualidad se considera normal cuando la cifra es de 40 000 000 de espermatozoides o más.1,5 Este indicador tiene las mismas implicaciones y limitaciones que la concentración/mL.

MOVILIDAD DE LOS ESPERMATOZOIDES

Para la correcta evaluación de la movilidad, el espermograma debe haber sido hecho en las primeras 2 h de haberse producido el eyaculado, a un mayor intervalo de tiempo desde la eyaculación se hallará un menor porcentaje de espermatozoides móviles. En años recientes se han desarrollado nuevas técnicas que permiten medir objetivamente y con medios computadorizados las características del movimiento de los espermatozoides, pero los equipos no están disponibles en muchos centros, pues son costosos. Por esta razón, la OMS recomienda un sistema simple de medir la movilidad espermática sin necesidad de equipos complejos, para esto la movilidad se divide en 4 categorías, a saber: a) movilidad progresiva rápida, b) movilidad progresiva lenta, lineal o no, c) movilidad no progresiva y d) inmovilidad (espermatozoides inmóviles).1

Se considera normal cuando el 50 % de los espermatozoides o más presentan una movilidad progresiva rápida (categoría a).1,5,6 La disminución de la movilidad se denomina astenozoospermia, puede ser un hallazgo aislado en el espermograma o acompañarse de alteraciones en la concentración y morfología normal de los espermatozoides (que es lo más común), en este último caso indica un daño global de la espermatogénesis.

La disminución de la movilidad espermática tiene múltiples causas que no son posible diagnosticar por el simple análisis seminal y en la mayoría de los casos tampoco es posible establecer un pronóstico por este examen. Una excepción a lo dicho anteriormente es el hallazgo de una movilidad menor del 5 % o incluso nula por completo, asociada a densidad, morfología y viabilidad espermática normal o muy cercanas a lo normal, en este caso es muy probable se trate de un síndrome de cilias inmóviles, trastorno de causa genética que es irreversible y que por tanto hasta el presente los pacientes son definitivamente estériles; el diagnóstico de certeza se realiza por medio de la microscopia electrónica.12

Se considera que es menos probable que un hombre sea fértil si tiene menos del 40 % de espermatozoides con movimiento lineal progresivo,1,13 pero no existe una relación directa entre el porcentaje de espermatozoides móviles y la fertilidad potencial de un individuo.

En ocasiones, al analizar el semen por el microscopio, se observan espermatozoides aglutinados, estas aglutinaciones pueden ser cabeza-cabeza, cola-cola, pieza intermedia-pieza intermedia o cualquier otra combinación. La aglutinación puede ser un fenómeno normal siempre que no afecte a más del 10 % de los espermatozoides del eyaculado.6 Cifras mayores pueden deberse a trastornos inmunológicos o a infecciones.4,5,7,13 Es importante conocer que la aglutinación puede interferir la medición de la movilidad y si tenemos una muestra de semen donde se informa aglutinación y movilidad disminuida es necesario repetir el examen antes de hacer conclusiones.

VIABILIDAD DE LOS ESPERMATOZOIDES

Cuando en un espermograma se comprueba astenozoospermia es necesario medir la viabilidad o porcentaje de espermatozoides vivos; esto permite precisar si la baja movilidad se debe en realidad a que existe un gran número de espermatozoides muertos, lo que habitualmente tiene un peor pronóstico.

En 1986, la OMS daba como valor normal el hallazgo de 60 % o más de espermatozoides vivos, en la segunda edición del Manual de laboratorio de la OMS para el examen del semen humano,6 se daba como valor normal 50 % o más de espermatozoides vivos, mientras que en la tercera edición de este Manual la cifra normal se considera 75 % o más.1 En nuestro laboratorio la cifra normal, basada en un estudio de hombres sanos, es de 50 %. Estas diferencias demuestran la importancia de que cada laboratorio establezca sus valores normales.

El hallazgo en un espermograma de una disminución de la movilidad espermática con un porcentaje normal de espermatozoides vivos sugiere la existencia de anomalías estructurales de la cola de los espermatozoides, cuyo diagnóstico de certeza sólo puede hacerse por microscopia electrónica; estas anomalías, entre las que se incluye el síndrome de cilias inmóviles mencionado anteriormente, tienen muy mal pronóstico.

Si la concentración y la morfología de los espermatozoides es normal y el porcentaje de espermatozoides muertos es mayor de lo normal el trastorno se ha denominado necrozoospermia. Este hallazgo se consideró muy raro, de pésimo pronóstico y de etiología desconocida. En la actualidad, la mayoría de los investigadores dudan de su existencia y lo atribuyen a defectos en la técnica de tinción, incluso en la última edición del Manual de la OMS1 no se incluye este término. En el laboratorio de nuestro Instituto nunca hemos encontrado un caso en más de 30 años de trabajo.

MORFOLOGÍA NORMAL DE LOS ESPERMATOZOIDES

El criterio de nivel normal de la morfología espermática ha variado a través del tiempo. Los estudios clásicos de la era moderna consideran como normal el hallazgo del 50 % o más de espermatozoides de morfología normal, cifra que utilizamos en nuestro laboratorio y que era la recomendada por la OMS.6 En fecha reciente se ha sugerido que cuando se utilizan criterios "estrictos" de normalidad, el límite debe ajustarse en un nivel inferior.

Aunque no hay estudios clínicos que permitan hacer conclusiones definitivas, empíricamente muchos autores (incluyendo los expertos de la OMS) han recomendado tomar como valor de referencia la cifra de 30 % o más de formas normales.1 y en fecha más reciente se ha sugerido que el límite normal es 14 %.14 El uso de los criterios estrictos, descriptos por Kruger, tiene el inconveniente de que es necesaria una tinción especial que no está disponible en todos los laboratorios. El aumento de formas anormales puede existir aisladamente y se denomina teratozoospermia,1 pero con más frecuencia se asocia a alteraciones de la concentración y movilidad de los espermatozoides.

La relación de la morfología espermática con la fertilización es de difícil interpretación pues en un mismo eyaculado se presenta una gran variabilidad y en muchos espermatozoides anormales se observan múltiples defectos. No es frecuente que en un paciente dado se presente un defecto único en todos los espermatozoides o en la mayoría de ellos.14 Por estas razones, en la literatura no hay un acuerdo sobre si el resultado de la morfología debe expresarse en forma global (total de espermatozoides normales y anormales) o si es más conveniente especificar el porcentaje de ellos con anomalías de la cabeza, pieza intermedia y cola; incluso se ha sugerido que el número promedio de defectos por espermatozoide puede ser un predictor de su función.6

La teratozoospermia puede observarse en un gran número de trastornos, como el varicocele, la sepsis seminal, el estrés y la exposición a agentes externos nocivos, entre otros,2,3,7,13 por lo cual su presencia no es suficiente para establecer un diagnóstico causal. En cuanto a su valor pronóstico, también es muy difícil de establecer, aunque es necesario aclarar que en raras ocasiones se encuentran anomalías morfológicas que invariablemente den lugar a esterilidad, entre estas tenemos los espermatozoides de cabeza redonda, los de cabeza en forma de pera y los de cabeza en forma de cabeza de alfiler. Para comunicarle al paciente su mal pronóstico recomendamos que se haya comprobado que esta anomalía existe en más del 95 % de sus espermatozoides.

OTRAS CÉLULAS EN EL SEMEN

El semen eyaculado invariablemente contiene otras células además de los espermatozoides, entre ellas se incluyen células epiteliales de la uretra, células espermatogénicas inmaduras de distintos tipos y leucocitos. La concentración del total de células debe medirse y dar su resultado en porcentaje; se considera normal que el eyaculado no contenga más del 5 % de estas células.6
La presencia de células espermatogénicas inmaduras en el eyaculado es un signo de irritación del epitelio germinal y en ocasiones hemos observado este fenómeno si se producen eyaculaciones repetidas o después de un tratamiento de la oligozoospermia idiopática.2,7 Su presencia no es útil para establecer un diagnóstico causal ni para conocer el pronóstico.

Las células de mayor importancia son los leucocitos; se considera que en un eyaculado normal debe haber menos de 1 000 000/mL. La presencia de cantidades mayores de leucocitos se denomina leucocitospermia y no siempre se debe a procesos infecciosos, pero la ausencia de ellos tampoco nos asegura que no exista una sepsis de las vías seminales.1 No obstante, aunque la leucocitospermia per se no asegura el diagnóstico de infección sí se considera un signo de sospecha, que en asociación con otros signos seminales y clínicos confirman dicho diagnóstico. Estos signos y síntomas son los siguientes: leucocitospermia repetida, dolor al eyacular, antecedentes de infección genitourinaria o de enfermedades de transmisión sexual, examen anormal de la próstata, epidídimos y vesículas seminales, análisis anormal del líquido prostático, alteraciones de las características físicas o bioquímicas del plasma seminal y análisis bacteriológico anormal. Seguimos los criterios de la OMS4,5 en cuanto a la combinación de 2 o más de estos signos para establecer el diagnóstico de sepsis de las vías seminales. La importancia de este diagnóstico radica en la posibilidad de su tratamiento inmediato con antibióticos específicos para así evitar secuelas a largo plazo.

Nosotros no hemos encontrado relación entre infecciones subclínicas (por gonococo u otros microorganismos) y alteraciones del espermograma antes ni después del tratamiento específico;15-18 tampoco hemos hallado diferencias entre pacientes infértiles con infecciones seminales subclínicas y sin ellas.16-18 Otros autores han obtenido resultados si-milares,5,14 por lo cual está en duda que la infección seminal tenga un efecto deletereo inmediato sobre la fertilidad, esto no significa que no deba ponerse tratamiento inmediato al paciente.

CARACTERÍSTICAS FÍSICAS DEL SEMEN

Las características físicas del semen, como son su apariencia, viscosidad o consistencia, volumen y pH tienen valor sobre todo cuando se analizan en conjunto con los otros indicadores.

APARIENCIA

El semen normal recién eyaculado tiene una apariencia homogénea y gris-opalescente a la inspección simple. Si la apariencia es anormal, el laboratorio debe consignar qué tipo de anormalidad existe. En ocasiones, el semen puede aparecer menos opaco si la concentración de espermatozoides es muy baja, otras veces es de color carmelita, pardo o marrón si contiene hematies. En los pacientes con esta última alteración, conocida con el nombre de hemospermia o hematospermia, es necesaria una valoración cuidadosa por un urólogo.

CONSISTENCIA O VISCOSIDAD

No se conoce la causa por la cual en algunos pacientes se observa una consistencia aumentada o la presencia de bridas mucosas, aunque algunos autores han sugerido que podría ser un signo de infección.1,2,6,13

La importancia de este hallazgo es que el médico debe conocer que esta alteración puede interferir la medición de otros indicadores como la concentración y la movilidad de los espermatozoides; por tanto, cuando se informa esto y hay alteraciones de esos indicadores es necesario repetir el espermograma antes de dar conclusiones al paciente.

VOLUMEN EYACULADO

Los criterios de normalidad en relación con el volumen de semen eyaculado también ha sufrido variaciones. En nuestro laboratorio consideramos como normal el volumen entre 1,5 y 6 mL, mientras que en la última edición del Manual de la OMS6 se considera normal 2 mL o más; según este último criterio nunca podría hablarse de un volumen aumentado. Nosotros seguimos aceptando como límites normales las primeras cifras, o sea entre 1,5 mL y 6 mL, por razones que expondremos a continuación.

El volumen puede hallarse disminuido (<>

Algunos autores han sugerido que un volumen seminal aumentado (> 6 mL) puede ser un signo de infección de las vías seminales y, en particular, de las vesículas seminales. Nosotros no hemos encontrado ninguna relación entre el volumen seminal y la presencia de infecciones, pero sí hemos observado que cuando un paciente tiene un volumen aumentado con gran frecuencia se asocian alteraciones de otros indicadores seminales.20,21

pH DEL SEMEN

El pH del semen varía normalmente en un rango muy estrecho (7,2 - 8,0), pocos son los trastornos capaces de alterarlo.1 Es importante asegurarse que el laboratorio esté usando el papel de pH adecuado pues de otra manera las lecturas pueden ser falsas; el mejor es el papel con rango 6,4 - 8,0, que es el que más se ajusta al pH del semen, pero en su defecto puede usarse el de rango 6,1 - 10,0. Nosotros hemos visto estudios de otros laboratorios donde se ha informado un valor de 10,0 y hasta 11,0, lo que desde el punto de vista biológico es totalmente imposible.

Se ha sugerido que un pH elevado (> 8) puede considerarse un signo de infección seminal si se asocia a otros síntomas y signos de sospecha,1,5 mientras que un pH disminuido (<>

ANÁLISIS BIOQUÍMICO DEL PLASMA SEMINAL

Aunque el análisis bioquímico del plasma seminal no forma parte del espermograma tradicional, en la actualidad, en muchos laboratorios se están realizando mediciones de varios marcadores de la función de las glándulas sexuales accesorias.

PRINCIPALES MARCADORES SEMINALES DE LA FUNCIÓN DE LAS GLÁNDULAS
SEXUALES ACCESORIAS

Glándulas accesorias Marcadores

Epidídimos Alfaglucosidasa

Carnitina libre
Glicerilfosforilcolina

Vesículas seminales Fructosa
Prostaglandinas

Próstata Ácido cítrico
Fosfatasa ácida
Cinc (Zn)

El análisis bioquímico está indicado especialmente cuando el volumen eyaculado se encuentra por debajo de lo normal (<>

En general, la disminución de la función secretoria de dichas glándulas se refleja en una disminución en el plasma seminal del marcador específico. Un inconveniente de estas determinaciones es que en ocasiones hay trastornos, por ejemplo infecciones, que causan disminución de la función secretoria de una glándula, pero la cantidad total del marcador todavía se mantiene en el rango "normal"; también puede ocurrir que la infección cause un daño irreversible del epitelio secretor y que entonces, incluso después de curada ésta con tratamiento, el valor del marcador se mantenga por debajo del rango normal.1

Además de las infecciones seminales, que son la causa más común, otros trastornos que pueden afectar la capacidad secretora de las glándulas sexuales accesorias son las inflamaciones (de cualquier causa), así como las obstrucciones totales o parciales de las vías seminales, generalmente secuelas de infecciones o inflamaciones. Aunque, teóricamente, los tumores de la región y las anomalías congénitas de las glándulas accesorias también pueden provocar disminución de su función, en la práctica clínica diaria estos trastornos son muy raros

ANALISIS DE LABORATORIO

MATERIALES

Mx de semen.
Pipetas.
Micropipetas.
Portaobjeto y cubreobjeto.
Cámara de Neubauer.
Eosina al 5%



TOMA DE MX

Hora de la toma de Mx: 9:45 am.
Licuefacción: 11:37 am.

Nombre: anonimo
Edad: 23 a

ANÁLISIS MACROSCÓPICO:

Color: Blanco-Amarillento.
Volumen: 1.2 ml.
Filancia: 5 cm.
pH: 8
Aspecto: Homogéneo.


ANALISIS MICROSCOPICO

Contaje celular:

Móviles (clase A): 64
Móviles lentos (clase B): 20
Móviles no progresivos (clase C): 10
Inmóviles (clase D): 6

INTERPRETACION:

Más del 50 % con progresión lineal categoría A+B.
Más del 30 % con morfología normal.

Contaje celular en la cámara de Neubauer.

1) Se realizó una dilución 1:10
2) Se contaron 10 cuadrados grandes de cada cámara.
3) En la primera: 27 espermatozoides.
4) En la segunda: 30 espermatozoides.
5) En promedio: 29/4: 7.25 x 1.000.000.
6) En total: 7.250.000 espermatozoides/ml.

NOTA. La división entre 4 era lo que correspondía de acuerdo a la dilución realizada (1:10) y el conteo en los 10 cuadrados.

INTERPRETACION:

Más del 50 % con progresión lineal categoría A+B.
Más del 30 % con morfología normal.

Contaje celular en la cámara de Neubauer.

1) Se realizó una dilución 1:10
2) Se contaron 10 cuadrados grandes de cada cámara.
3) En la primera: 27 espermatozoides.
4) En la segunda: 30 espermatozoides.
5) En promedio: 29/4: 7.25 x 1.000.000.
6) En total: 7.250.000 espermatozoides/ml.

NOTA. La división entre 4 era lo que correspondía de acuerdo a la dilución realizada (1:10) y el conteo en los 10 cuadrados.

INTERPRETACION

El Px. Presenta oligozoospermia o disminución del número de espermatozoides con relación a lo establecido como normal que son 20.000.000 espermatozoides/ml.

ANALISIS:

Debemos tomar en cuenta que para el momento de la toma de muestra el paciente se encontraba estresado y no guardo la abstinencia alcohólica, además comento que no recogió bien la muestra de acuerdo a lo explicado y que descartó accidentalmente parte de la misma. Por esto se entiende que el volumen haya sido bajo de acuerdo a lo normal (2ml.) presentando hipospermia y podemos inferir que la oligozoospermia posiblemente sea por la misma razón puesto que no sabemos cual fracción descarto accidentalmente ya que si fue la primera allí se encontraba el mayor número de espermatozoides.

Sin embargo a pesar de la baja concentración de espermatozoides y la hipospermia, la morfología y movilidad de los mismos fue bastante aceptable y normal.

Otros casos donde se presenta oligozoospermia:

Obstrucción de los conductos seminales.
El testículo produce un número bajo de espermatozoides.


Se debería de realizar a futuro otro análisis seminal para descartar las patologías ya mencionadas



TINCION CON EOSINA.

1) mezclar una gota de semen con una gota de solución de eosina al 5% en un portaobjeto y cubrir con el cubreobjeto.
2) luego de 1 o 2 minutos observar el preparado al microscopio con 40x
3) contar 100 espermatozoides los cules estaran, no teñidos (vivos) y los teñidos (muertos).

Espermatozoides muertos: 11
Espermatozoides vivos: 89


INTERPRETACION

El contaje con la eosina se ralaciona con lo que se conto en el examen al fresco, pero no con lo observado en la camara de neubauer. Pero ya fueron explicadas las posibles causas; lo recomendable es volver a realizarse otro analisis si llega a presentar problemas a fururo.

CONCLUSION

La esterilidad del varón no es propiamente una enfermedad, sino una secuela de algo que se haya padecido. Esta secuela puede tener origen congénito o haber surgido tras algún proceso infeccioso o traumático.

Enfermedades como la Varicocele o inflamación del escroto causada por la excesiva dilatación de las venas, la diabetes severa, la Acromegalia o crecimiento desproporcionado de las extremidades, la Aplasia Germinal que provoca que los testículos sean más pequeños de lo normal, las Paperas, o diversas infecciones del aparato urinario, pueden provocar que el hombre dicha esterilidad. Por otra parte, el estrés, el alcoholismo o ciertas disfunciones sexuales también pueden conllevar dificultades a la hora de dejar embarazada a la pareja.

Es preciso analizar dos o más muestras de semen, ya que se puede observar una variabilidad sustancial en el recuento de espermatozoides y su motilidad en las muestras sucesivas provenientes del mismo individuo. Las muestras de los espermatozoides pueden ser caracterizadas como potencialmente fértiles, subfértiles o infértiles (azoospermia).

BIBLIOGRAFIA

BISHOP, Michael L. “Química clínica” 5 ed. 2007.

GONZALEZ, J. M. Bioquímica clínica. 1998.

bvs.sld.cu/revistas/end/vol9_1_98/end11198.htm - 38k

Guía de laboratorio de bioquímica clínica, séptimo semestre. Análisis del semen. Universidad de oriente, bolívar.

EVALUACION DEL FOSFORO

UNIVERSIDAD DE ORIENTE
NÚCLEO BOLÍVAR
ESCUELA DE CIENCIAS DE LA SALUD
“Dr. Francisco Battistini Casalta”
Departamento de Bioanálisis
Bioquímica Clínica

EVALUACION DEL FOSFORO

PROF:
GERMAN GUZMAN BACHILLER: GARCIA, YELIFER 17.591.715.

CIUDAD BOLÍVAR, JUNIO 2008

INDICE


INTRODUCCION………………………………………………………………… 3
DESARROLLO………………………………………………………………..…... 5
FOSFORO………………………………………………………………………..…. 5
FISIOLOGIA DEL FOSFORO……………………………………………....… 5
REGULACION DEL FOSFORO………………………………………..…….. 6
DISTRIBUCION DEL FOSFORO……………………………………..……… 7
BENEFICIO DEL FOSFORO…………………………………………..………. 7
PODEMOS ENCONTRAR EL FOSFORO………………………..………. 7
HIPERFOSFATEMIA…………………………………………………..………… 8
HIPOFOSFATEMIA…………………………………………………..………….. 9
VALORES DEL CONSUMO DE FOSFORO DIARIO……..………….. 9
RECOLECCION Y ALMACENAMIENTO DE LA MUESTRA…….. 10
TECNICA…………………………………………………………………………….. 10
FUNDAMENTO…………………………………………………………………… 10
VALORES DE REFERENCIA…………………………………………………… 11
PROCEDIMIENTO.………………………………………………………………. 11
PREPARACION……………………………………………………………………. 11
LIMITACIONES……………………………………………………………………. 11
CONCLUSIONES………………………………………………………………….. 11
BIBLIOGRAFIA……………………………………………………………………… 12

INTRODUCCION.


Los electrólitos son iones capaces de llevar una carga eléctrica. Se clasifican como aniones o cationes con base en el tipo de carga que llevan. Estos nombres se determinaron hace años con base en cómo el ion migra en un campo eléctrico. Los aniones tienen una carga negativa y se mueven hacia el ánodo, mientras que los cationes migran en la dirección del cátodo debido a su carga positiva.

Los electrólitos son un componente esencial en numerosos procesos, entre otros la regulación volumétrica y osmótica (Na, Cl, K); ritmo cardíaco y contractilidad (K, Mg, Ca); cofactores en la activación de enzimas (como Mg, Ca, Zn); regulación de las bombas iónicas (Mg) de adenosina trifosfatasa (ATPasa); equilibrio ácido-base (HCO₃, K, Cl); coagulación de sangre (Ca, Mg); excitabilidad neuromuscular (K, Ca, Mg); y la producción y uso de ATP a partir de glucosa (como Mg, PO ). Debido a que muchas de estas funciones requieren concentraciones de electrólitos para mantenerse dentro de intervalos reducidos, el cuerpo tiene sistemas complejos para monitorear y mantener concentraciones de electrólitos.

La naturaleza dispone de sistemas muy eficientes para conservar constante la cantidad de cationes divalentes en el organismo; por este motivo, la concentración sérica de calcio, magnesio y fósforo varía dentro de un margen muy pequeño en vivo. Lo anterior obedece a que estos cationes participan en un gran número de los fenómenos metabólicos del organismo

El calcio y el fósforo son minerales importantes para el organismo. Estos forman el componente mineral de los huesos y existen en la sangre y en el interior de las células como partículas cargadas llamadas iones.

El contenido total de fósforo en una persona adulta sana de 70 kg de peso, es aproximadamente de 7.0 g. (23 mol). El 80% está contenido en el hueso, 9% en el sistema músculo esquelético y el resto en las vísceras y el líquido extracelular.

El Fósforo puede ser encontrado en el ambiente más comúnmente como fosfato. Los fosfatos son substancias importantes en el cuerpo de los humanos porque ellas son parte del material de ADN y tienen parte en la distribución de la energía. Los fosfatos pueden ser encontrados comúnmente en plantas. Los humanos han cambiado el suministro natural de fósforo radicalmente por la adición de estiércol ricos en fosfatos. El fosfato era también añadido a un número de alimentos, como quesos, salsas, jamón. Demasiado fosfato puede causar problemas de salud, como es daño a los riñones y osteoporosis. La disminución de fosfato también puede ocurrir. Estas son causadas por uso extensivo de medicinas.

Después del Calcio, el fósforo (alimento del cerebro, como se dice) es el segundo mineral que abunda en nuestro cuerpo y en la mayoría de los alimentos. El fósforo (P) es un mineral que desempeña papeles determinantes en la estructura y función del organismo.

En esta práctica se determino fosfato mediante el método colorimétrico.

DESARROLLO.

El hueso es un tejido con gran actividad metabólica, que depende de un sincicio celular, que a su vez condiciona la remodelación esquelética. Cerca de 500 mg de calcio pueden ser recirculados por día, por esa unidad de remodelamiento. Una gran variedad de hormonas, vitaminas, factores locales, además de la hormona paratiroidea y la calcitonina influyen terminantemente en el metabolismo y el recambio óseo.

FÓSFORO

El fósforo por su parte, es el constituyente más importante de los fosfolípidos de las membranas celulares; es el componente metálico de los nucleótidos de alta energía en las células; en respuesta a hormonas, fosforila la proteinquinasa y algunas enzimas del borde en cepillo.

Las principales hormonas que gobiernan el metabolismo mineral son: la hormona paratiroidea (PTH), la 1-25-dihidroxivitamina D3 (1-25-D3 o calcitriol) y la tirocalcitonina (CT).

Fisiología del fosfato: encontrados en todas las partes de las células vivientes, los compuestos de fosfato participan en muchos de los procesos bioquímicos más importantes. Los materiales ácido desoxirribonucleico (DNA) y ácido ribonucleico (RNA) son fosfodiésteres complejos. La mayor parte de las coenzimas son ésteres de ácido fosfórico o pirofosfórico. Los depósitos más importantes de energía bioquímica son ATP, fosfato de creatina y fosfoenolpiruvato. La deficiencia de fosfato puede conducir a agotamiento de ATP, que en última instancia es responsable de muchos de los síntomas clínicos observados en la hipofosfatemia.

Las alteraciones en la concentración de 2,3-bifosfoglicerato (2,3-BPG) en los eritrocitos afectan la afinidad de la hemoglobina hacia el oxígeno, con un incremento que facilita la liberación de oxígeno en el tejido y una disminución que hace menos disponible el enlace de oxígeno a hemoglobina. Al afectar la formación de 2,3-BPG, la concentración de fosfato inorgánico afecta de modo indirecto la liberación de oxígeno de la hemoglobina.

Entender la causa de una concentración de fosfato alterada en la sangre suele ser difícil porque los cambios transcelulares de fosfato son una causa importante de hipofosfatemia en la sangre. Es decir, un desplazamiento incrementado de fosfato hacia las células puede agotar el fosfato en la sangre. Una vez que la célula capta el fosfato, permanece ahí para ser empleado en la síntesis de compuestos fosforilados. Cuando se metabolizan estos compuestos de fosfato, el fosfato inorgánico sale de la célula en forma lenta hacia la sangre, donde el riñón es el regulador principal.

Regulación: el fosfato en la sangre puede ser absorbido en el intestino a partir de fuentes dietéticas, ser liberado de las células hacia la sangre y el hueso puede perder fosfato. En individuos saludables, todos estos procesos son relativamente constantes y fácilmente regulados por la excreción o reabsorción renal de fosfato.

La modificación de cualquiera de estos procesos puede alterar las concentraciones de fosfato en la sangre; sin embargo, la pérdida de regulación por los riñones tendrá el efecto más profundo. Aunque otros factores, como vitamina D, calcitonina, hormona del crecimiento y estado ácido-base, puede afectar la regulación renal de fosfato, el factor más importante es la PTH, que en general disminuye las concentraciones de sangre al incrementar la excreción renal.

La vitamina D actúa para incrementar el fosfato en la sangre. La vitamina D incrementa la absorción de fosfato en el intestino y la reabsorción en el riñón.

La hormona del crecimiento, que ayuda a regular el desarrollo del esqueleto, puede afectar las concentraciones circulantes de fosfato. En casos de secreción excesiva o administración de hormona del crecimiento, las concentraciones de fosfato en la sangre podrían aumentar como resultado de la excreción renal de fosfato.

Distribución: aunque la concentración de todos los compuestos de fosfato en la sangre es de alrededor de 12mg/dl, la mayor parte es fosfato orgánico y sólo cerca de 3 a 4 mg/dl es fosfato inorgánico. El fosfato es el anión intracelular predominante, con concentraciones intracelulares variantes, dependiendo del tipo de célula. Cerca de 80% del depósito corporal total de fosfato está contenido en el hueso, 20% en los tejidos blandos y menos de 1% es activo en el suero o plasma.

Beneficios de el Fósforo

Su principal papel junto con el calcio es en el mantenimiento de los huesos y dientes. Como se encuentra en todas las células de nuestro cuerpo, participa de casi todos los procesos metabólicos como en el energético.

Ayuda a mantener el PH de la sangre ligeramente alcalino. Componente importante del ADN, forma parte de todas las membranas celulares sobre todo en los tejidos cerebrales. Aumenta también la resistencia de los atletas y proporcionarles una mejor ventaja competitiva.

Encontramos el Fósforo

Al encontrarse en la mayoría de los alimentos, solo mencionaremos los que contienen más de 0,4 gr. por cada 100g.

· Frutos secos: girasol, sésamo, pistacho, almendras.
· Legumbres: soja, alubias, garbanzos y lentejas.
· Cereales: trigo, copos de avena, arroz integral, levadura, salvados de trigo.

Los niveles por encima de lo normal pueden indicar:

Metástasis ósea
Hipocalciemia
Hipoparatiroidismo
Aumento de la ingesta de fosfato en la dieta o por vía IV
Enfermedad hepática
Insuficiencia renal
Sarcoidosis

Hiperfosfatemia:

Los niveles de fosfato en sangre por encima de los valores de referencia. Los pacientes con mayor riesgo de hiperfosfatemia son quienes manifiestan insuficiencia renal crónica o aguda. Una ingestión mayor de fosfato o liberación cada vez mayor de fosfato celular también puede causar hiperfosfatemia. Debido a que es posible que aún no hayan desarrollado metabolismo maduro de PTH y vitamina D, los neonatos son en especial susceptibles a hiperfosfatemia causada por ingestión incrementada, como por leche de vaca o laxantes. La descomposición cada vez mayor de células puede a veces ocasionar hiperfosfatemia, como con infecciones graves, ejercicio intenso, trastornos neoplásicos o hemólisis intravascular. Debido a que los linfoblasto inmaduros tienen cerca de cuatro veces el contenido de fosfato de linfocitos maduros, los pacientes con leucemia linfoblástica son en especial susceptibles a hiperfosfatemia.

Los niveles por debajo de lo normal pueden indicar:

Cetoacidosis diabética
Hipercalciemia
Hiperinsulinismo
Hiperparatiroidismo
Muy poca ingesta de fosfato o vitamina D en la dieta, ocasionando raquitismo (niñez) u osteomalacia (adultez)

Hiposfosfatemia:

Los valores de fosfato por debajo de los valores de referencia. La hipofosfatemia ocurre en casi 1 a 5% de los pacientes hospitalizados. La incidencia de hipofosfatemia se incrementa a 20 a 40% en pacientes con los siguientes trastornos: cetoacidosis diabética, enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC), asma, malignidad, tratamiento a largo plazo con nutrición parenteral total (NPT), enfermedad inflamatoria intestinal, anorexia nerviosa y alcoholismo. La incidencia se incrementa a 60 a 80% en pacientes de la UCI (unidad de cuidados intensivos) con sepsis. Además, la hipofosfatemia también puede ser causada por mayor excreción renal, como con el hiperparatiroidismo, y la reabsorción intestinal reducida, como la deficiencia de vitamina D o el uso de antiácido.

Aunque la mayor parte de los casos son moderados y pocas veces causan problemas, la hipofosfatemia grave (<>

Otras afecciones por las cuales se puede realizar el examen:

Neoplasia endocrina múltiple (NEM) II
Hiperparatiroidismo secundario
Hiperparatiroidismo terciario

De acuerdo con el Instituto de Medicina (Institute of Medicine), los consumos de fósforo recomendados en la dieta son los siguientes:

0-6 meses: 100 mg/día
7-12 meses: 275 mg/día
1 a 3 años: 460 mg/día
4 a 8 años: 500 mg/día
9 a 18 años: 1.250 mg/día
Adultos: 700 mg/día
Mujeres embarazadas o lactantes:
menores de 18 años: 1.250 mg/día
mayores de 18: 700 mg/día

Recolección y almacenamiento de la muestra:

· Suero claro libre de hemolisis.

· El plasma no debe tener anticoagulantes ya que se producen falsos valores bajos.

· Muestra hemolisada puede dar falsos valores elevados.

· El fosforo inorgánico es estable en suero por una semana refrigerado.

· El suero debe ser separado lo más pronto posible de los glóbulos rojos.

TÉCNICA. (INVELAB S.A)
DETERMINACIÓN DE FOSFORO EN SUERO. MÉTODO COLORIMÉTRICO

Muestra: el suero o plasma con heparina de litio es aceptable para análisis. Los anticoagulantes oxalato, citrato o EDTA no se deben usar porque interfieren con el método analítico. Se debe evitar la hemólisis como resultado de las concentraciones mayores dentro de los eritrocitos. Las concentraciones de fosfato circulante están sujetas a ritmo circadiano, con las concentraciones más altas tarde por la mañana y las más bajas por la noche.

Métodos: la mayor parte de los métodos actuales para determinación de fósforo tienen que ver con la formación de un complejo de fosfomolibdato de amonio. Este complejo incoloro se puede medir mediante absorción ultravioleta a 340 nm o se puede reducir para formar azul de molibdeno, un cromóforo azul estable, que se lee entre 600 y 700 nm.

FUNDAMENTO:

La medición de fosforo inorgánico en suero es generalmente acompañada por la formación de un complejo fosfomolibdato y posteriormente reducir este a un complejo de azul de molibdeno.

PO + H SO + (NH ) 6 MO O
4 H O Complejo MoPO azul de molibdeno

Valores de referencia de fósforo en suero:

2.5 a 4,8 mg/dl

PROCEDIMIENTO

Paciente: 1mL de reactivo + 0,02 mL de muestra.

Patron: 1mL de reactivo + 0,02 mL de estandart.

Blanco: 1 mL de reactivo.

PREPARACION

Se mezclo bien, se incubo por 5 minutos a temperatura ambiente, se leyó a 340 nm primero con el blanco reactivo para calibrar y se obtuvo la siguiente lectura.

Estándar: 4,74 mg/ dL

Paciente: 6,06 mg/ dL

Limitaciones del Procedimiento.

1. Muestra con valores que excedan 12,0 mg/dL deben ser diluidas con solución salina 1:1, repetir el ensayo y multiplicar el resultado por 2.

2. Los detergentes contienen fosfato, por lo tanto, no deben utilizarse para lavar la vidriería usada en este procedimiento

CONCLUSION.

El valor de la concentración de fosforo dio fuera de los valores de referencia.

Hago la acotación de que el paciente no se encontraba en ayuno y los valores deberían haber dado a los niveles inferiores, pero paso lo contrario.

El estudio de los electrolitos como el fosforo y el calcio son de mucha importancia porque ellos son parte de la mayoría de los procesos que ayudan a conservar la homeostasia del cuerpo y también como indicadores de diversas patologías.

Se pudo observar durante en esta práctica que la determinación de fosfato debe realizarse con mucho cuidado porque se alteran con el mínimo error en el procedimiento o el uso de materiales que alteran sus valores.

Para poder dar una conclusión o una patología más exacta el paciente se debe repetir una determinación de fosforo y hacer otras pruebas adicionales como son la determinación de calcio y de la PTH (paratohormona).

BIBLIOGRAFIA.

1.- Inserto de INVELAB S.A, para determinación de fosforo en suero. Método colorimétrico.

2.- Guía práctica de laboratorio # 6 de evaluación de la función osea.

3.- Bishop, Michael. Química clínica. Quinta edición. Mc Graw Hill.

4.- www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003478.htm - 26k -

5.- www.enbuenasmanos.com/articulos/muestra.asp?art=435 - 17k –

6.- www.lenntech.com/espanol/tabla-peiodica/P.htm - 23k -

7.- www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/002424.htm - 22k -

8.- www.terra.com/salud/articulo/html/sal12763.htm - 20k -

9.- www.drscope.com/privados/pac/generales/desequilibrio/calcio.htm - 54k -

Funcionamiento hepático

UNIVERSIDAD DE ORIENTE.
NÚCLEO BOLIVAR.
DEPARTAMENTO DE BIOANÁLISIS.

CÁTEDRA: Laboratorio De Bioquímica Clínica

EVALUACION DEL FUNCIONAMIENTO HEPÁTICO

Profesor.
Germán Guzmán.

Bachiller.
Garcia M, Yelifer.
C.I: 17.591.715.

Ciudad Bolívar, 25 de Abril de 2008

INDICE.

Introducción………………………………………………………………………... 3
Desarrollo.………………………………………………………………………….. 4
Causas de aumento……………………………………………………………… 5
Causas moderadas………………………………………………………………. 5
Causas de disminución.……………………………………………………….. 5
Materiales……………...…………………………………………………………… 6
Condiciones de la muestra……………………………………….…………… 6
Condiciones de la reacción……………………………………………………. 7
Técnica de ALT (fundamento)….……………………………………………. 7
Valores de referencia de ALT…...…………………………………………… 8
Procedimiento para la determinación de ALT……….…………………. 8
Cálculos de la determinación a ALT..…………………………………..… 8
Conclusiones de la determinación de AST….…………………………… 8
Técnica de AST (fundamento)…………… …….………………………….. 9
Valores de referencia de AST ………….……………………………………. 9
Procedimiento para la determinación de AST…………………………. 10
Cálculos de la determinación a ALT..…………………………………..… 10
Conclusiones de la determinación de AST..…………………………… 10
Limitaciones de los método……………………….……………………….… 10
Bibliografía………………………………………………………………………….. 11




INTRODUCCION.

La evaluación de pacientes con elevación de las transaminasas es un problema habitual en la práctica clínica, tanto del médico de atención primaria como del digestólogo. Muchos de estos casos se detectan de manera accidental, en pacientes sin síntomas de enfermedad hepática o biliar, en la analítica solicitada por otros motivos, como, por ejemplo, estudio preoperatorio, donaciones sanguíneas o “revisiones médicas”. Recientemente se ha comunicado que las alteraciones hepáticas no son correctamente evaluadas en Atención Primaria. En muchas ocasiones porque su médico pensó que el consumo de alcohol era la causa de las alteraciones, sin realizar ninguna investigación (debemos recordar que los pacientes alcohólicos tienen con más frecuencia hepatitis B y C), y en otras (hasta un 20%) porque ni siquiera fueron evaluadas.

Las transaminasas son enzimas que catalizan la transferencia reversible de un grupo amino entre un aminoácido y un cetoácido. Esta función es esencial para la producción de los aminoácidos necesarios para la síntesis de proteínas en el hígado. La aspartato aminotransferasa (= AST = glutámico oxalacético transaminasa = GOT ) se localiza sobre todo en la mitocondria y está presente en otros órganos, además del hígado, como son, en orden de frecuencia, el miocardio, músculo esquelético, riñones, cerebro, páncreas, pulmón, leucocitos y eritrocitos. Por el contrario, la alanina aminotransferasa (= ALT = glutámico pirúvico transaminasa = GPT) se localiza fundamentalmente a nivel citosólico en el hepatocito, lo que explica su mayor especificidad.

Ambas están presentes en suero en concentraciones inferiores a 30-40 UI/l, aunque el valor considerado como normal varía entre laboratorios, y se debería ajustar según sexo e índice corporal, presentando también algunas diferencias étnicas. La elevación plasmática de las transaminasas es un indicador sensible de daño hepatocelular, aunque no específico. Prácticamente cualquier enfermedad hepática que comporte un daño necroinflamatorio puede ser la causa. El aumento de transaminasas en sangre aparece cuando existe daño de la membrana celular y no siempre requiere la necrosis de los hepatocitos.
De hecho, hay escasa correlación entre el daño celular hepático y el grado de elevación de las transaminasas. Además, enfermedades no hepáticas también pueden ocasionar la elevación, aguda o crónica, de las cifras de transaminasas, sobre todo de la AST. Es el caso, por ejemplo, de procesos musculares como distrofias, polimiositis o traumatismos, o el infarto agudo de miocardio, incluso cuadros muy banales, tales como un proceso gripal, pueden producir elevaciones transitorias de las transaminasas. Es importante recordar que la elevación de un parámetro de laboratorio la definimos en función de criterios estadísticos que establecen la normalidad.

DESARROLLO

El perfil hepático es un conjunto de exámenes de sangre que indican si su hígado está funcionando bien. El hígado se encuentra en el abdomen y está ubicado cerca de su estómago. Es un órgano muy importante, porque descompone y almacena algunas sustancias como el azúcar, la grasa y las vitaminas. El hígado también remueve las drogas y otros químicos de su cuerpo.

Pruebas de función hepática


Función excretora Bilirrubina
Ácidos biliares

Función sintética Albúmina
Factores coagulación

Citolisis Transaminasas

Colestasis Bilirrubina
GGT y FA

Inflamación crónica Igs


Las pruebas rutinarias de función hepática pueden dividirse entre las que son valores reales de la función hepática, como seroalbúmina o tiempo de protombina; y aquellas que son simplemente marcadores de la enfermedad hepática o del sistema biliar, como las diferentes enzimas hepáticas.

Existen dos categorías generales de enzimas hepáticas. El primer grupo incluye las enzimas transaminasas: alaninoaminotransferasa (ALT) y la aspartato aminotransferasa (AST), antes conocidas como GPT y GOT respectivamente. Estas son enzimas indicadoras del daño a la célula hepática. El segundo grupo incluye ciertas enzimas hepáticas, como la fosfatasa alcalina y la gammaglutamiltranspeptidasa (GGT) las cuales indican obstrucción del sistema biliar, ya sea en el hígado o en los canales mayores de la bilis que se encuentran fuera de este órgano.

Las transaminasas TGO Y TGP son enzimas ampliamente distribuidas en el organismo con elevada concentración en corazón, hígado, músculo esquelético, riñón, eritrocitos. La actividad sérica en condiciones normales es muy baja o nula.

La TGP es una enzima con gran concentración en el en el hígado y en menor medida en los riñones, corazón los músculos.
Cuando hay una lesión de estos órganos la enzima es liberada a la sangre y aparece elevada en los análisis.

Como es una transaminasa más específicamente hepática que la GOT, aparece más elevada en las enfermedades hepáticas que en otras, por eso el cociente GPT/GOT será mayor de 1 en enfermedades ciertas enfermedades hepáticas como la hepatitis vírica.

La AST es más abundante en todos los tejidos humanos que la ALT. Las cifras de AST en suero están elevadas en las enfermedades hepatobiliares y cardiovasculares, en las miopatías y en otras afecciones diversas. Existen dos formas de AST: una motocondrial, que es la más abundante y una soluble en menor cantidad. Al contrario de la AST, la ALT se encuentra en su mayor parte en forma de enzima citoplasmática soluble, se encuentra principalmente en hígado, y en menor concentración en el miocardio y en otros tejidos.

Causas mas comunes en el aumento de las transaminasas: son encontrados niveles más altos de TGO y TGP en desordenes que causan la muerte de numerosas células (necrosis hepática extensa). Esto acontece en las hepatitis agudas A y B, en el daño pronunciado infligido por toxinas como la de una overdosis de acetaminofen (TYLENOL) o cuando el hígado es privado de sangre fresca que trae oxigeno y nutrientes. Las transaminasas en estas situaciones pueden variar de diez veces los límites superiores a lo normal para millares de unidades por mililitro.

Moderadas elevaciones de las transaminasas son comunes. Ellas son encontradas frecuentemente en pruebas de sangre de rutina en individuos saludables. Los niveles de las transaminasas en tales casos normalmente se sitúan entre 2 veces los límites superiores a lo normal y varias centenas de unidades. Es siempre importante sé hacer la media de los últimos cuatro resultados encontrados, para saber al cierto como están las transaminasas.

La causa más común de moderadas elevaciones de estas enzimas es el hígado graso (esteatoses). La causa más frecuente de hígado graso es el abuso de alcohol. Otras causas de hígado graso pueden ser la diabetes y la obesidad. La hepatitis C también está se tornando una causa importante de elevaciones de las transaminasas.

Causas menos comunes de transaminasas anormales pueden ser la hepatitis B crónica, la hemocromatosis, la enfermedad de Wilson y la hepatitis autoinmune. A pesar de no tan común cuanto en la hepatitis C, la hepatitis B puede se tornar crónica con resultados anormales en las transaminasas. Hemacromatosis es un desorden genético en el cual hay absorción excesiva de hierro ingerido en la alimentación conduciendo a la acumulación de hierro en el hígado y produciendo inflamación que puede llevar a la fibrosis y a la cirrosis.La enfermedad de Wilson es un desorden hereditario con acumulación excesiva de cobre en tejidos diversos inclusive el hígado y el cerebro. Cobre en el hígado pode producir inflamación y el cobre en el cerebro puede causar problemas psiquiátricos y perturbaciones motoras. La hepatitis autoinmune es provocada por los propios anticuerpos del organismo y sistemas de defensa que pasan a atacar el hígado. Raramente las transaminasas anormales pueden ser una señal de cáncer en el hígado.

MUESTRA: Suero o plasma

-Si la muestra a utilizar es plasma se debe usar heparina como anticoagulante.

-No utilizar muestras hemolizados.

Material requerido

-Espectrofotómetro

-Micropipetas

-Pipetas

-Tubos de ensayos

-Baño de agua a la temperatura indicada en el procedimiento a seguir, esto es si se utiliza un aparato manual.

-Cronometro

Condiciones de la muestra

- No utilizar muestras que hallan sido congeladas y descongeladas varias veces, pues ello puede ser causa de desnaturalización irreversible de la proteína constituyente de la enzima.

- Separar lo antes posible el coágulo del suero, pues ciertas enzimas (LDH y Fosfatasa Ácida) son componentes de las plaquetas, y se liberan al medio si existe destrucción de los mismos.

- No trabajar con muestras hemolizadas, ya que se han vertido los componentes intraeritrocitarios al plasma, sobre todo LDH y AST.

- Evitar el éxtasis venoso durante la extracción, pues se produce hipoxia y aumento de la permeabilidad de las células sanguíneas.

Condición de la reacción

-Disminución de Absorbancia

-Longitud de onda: 340 nm (Hg 334 ó 366)

-Temperatura de reacción: 37°C

-Factor de calibración: 1740

-Los volúmenes de muestra y de sustrato reconstituido: pueden reducirse proporcionalmente, sin que varíen los factores de cálculo correspondiente

TECNICA (Perfil Enzimático Hepático)

“Wiener Lab”. Unitest.“Determinación de Alanita Aminotransferasa (ALT), en suero”.

FUNDAMENTO

La ALT o GPT, cataliza la siguiente reacción:

L-alanina + 2-oxoglutarato GPT Piruvato + L-glutamato

Piruvato + NADH + H LDH L-lactato + NAD

Instrucciones para el uso de ALT: El kit trae un Buffer listo para preparar. Al Sustrato se le agregan 2 mL de Buffer, se tapa y se agita hasta que la disolución este completa y fechar.
VALORES DE REFERENCIA.

TEMPERATURA 25º C 30º C 37º C

HOMBRE Hasta 22 U/I Hasta 29 U/I Hasta 41 U/I
MUJER Hasta 17 U/I Hasta 22 U/I Hasta 31 U/I


PROCEDIMIENTO:
Micro técnica

En una cubeta mantenida a 37 ºC, colocar:

Sustrato reconstituido ……………….1 ml

Muestra………………………………………100 ul

Mezclar inmediatamente y disparar simultáneamente el cronometro. Una vez mezclada se lee en el aparato y registrar la abs, al minuto luego 2, 3 y 4 min.Como este es un equipo semi automatizado, realiza el mismo los cálculos y nos da el valor de los resultados.

Para el desarrollo de esta técnica, la temperatura de reacción es de 37°C, tiempo de reacción 4 minutos y el factor de calibración es de 1740.

CALCULOS:

Lect de la muestra: 8,928.
Se determina la diferencia promedio, restando cada lectura de la anterior y promediando los valores (DAbs /min). Y se utiliza este promedio para los cálculos de los resultados.X/4= DeltaAbs/min y el resultado se reportara en UL­/L.

CONCLUSION

Los valores obtenidos se encuentran dentro de los valores de referencia. Pero para diagnosticar un daño hepático se necesita de la evaluación de otras pruebas más específicas; como la lactato deshidrogenasa, la gamma-glutamiltransferasa, y otras.

TECNICA (Perfil Enzimático Hepático)

“Wiener Lab”. Unitest.
Método AST o GOT: Basado en el siguiente esquema re accionante:

FUNDAMENTO

L-aspartato + 2-oxoglutarato GOT oxalacetato + L-glutamato

Oxalacetato + NADH + H MDH L-malato + NAD

Instrucciones para el uso de AST: El kit trae un Buffer listo para preparar. Al Sustrato se le agregan 20 mL de Buffer, se tapa y se agita hasta que la disolución este completa y fechar.

VALORES DE REFERENCIA.

TEMPERATURA 25º C 30º C 37º C
HOMBRE Hasta 18 U/I Hasta 25 U/I Hasta 38 U/I
MUJER Hasta 15 U/I Hasta 221U/I Hasta 32 U/I

PROCEDIMIENTO:

Micro técnica

En una cubeta mantenida a 37 ºC, colocar:

Sustrato reconstituido …………………1 ml

Muestra………………………………………100 ul

Para el desarrollo de esta técnica, la temperatura de reacción es de 37°C, tiempo de reacción 4 minutos y el factor de calibración es de 1740.

CALCULOS:

Lect de la muestra: 13,306.
Se determina la diferencia promedio, restando cada lectura de la anterior y promediando los valores (DAbs /min). Y se utiliza este promedio para los cálculos de los resultados.X/4= DeltaAbs/min y el resultado se reportara en UL­/L.

CONCLUSION

Los valores obtenidos se encuentran dentro de los valores de referencia. Pero para diagnosticar un daño hepático se necesita de la evaluación de otras pruebas más específicas; como la lactato deshidrogenasa, la gamma-glutamiltransferasa, y otras.


LIMITACIONES DE LOS METODOS:
Ver sustancias interferentes conocidas en MUESTRAS.
- Absorbancia inicial baja: cuando una vez agregado el suero la primera lectura (tiempo 0) es inferior a 0,800 D.O; estando el sustrato en condiciones, indica una muestra con muy alta actividad de GOT o GPT (que consume el NADH aún antes de esta lectura) o con una concentración de cetoácidos endógenos particularmente elevada. En este caso, repetir la determinación con muestra diluida con solución fisiológica y multiplicar el resultado por la dilución efectuada.
- La humectación es causa de deterioro el sustrato.

BIBLIOGRAFIA.
1. Inserto de Wiener Lab”. Unitest, C.A para determinación de GOT (AST) y GPT(ALT) por el método UV optimizado en suero o plasma.
2. Guía práctica de laboratorio # 5 de Evaluación del funcionalismo hepático. Bioquímica clínica 7mo semestre de Bioanálisis.
3. www.faes.esarchivos_pdfdownloadpandamodulo5REVIS5.PDF
4. www.buenasalud.com
5. www.svnp.es/Documen/transaminasas.pdf
6. www.scribd.com/doc/2150578/PERFIL-HEPATICO-PRACTICAS-DE-LAB
7. www. boards2.melodysoft.com

Práctica de Contol de Calidad. Bioquímica Clinica

UNIVERSIDAD DE ORIENTE.
NÚCLEO BOLIVAR.
DEPARTAMENTO DE BIOANÁLISIS.
CÁTEDRA: Laboratorio De Bioquímica Clínica.

PRACTICA DE CONTROL DE CALIDAD.

Profesor.
Germán Guzmán.
Bachiller. Garcia M, Yelifer.
C.I: 17.591.715.


Ciudad Bolívar, 25 de Abril de 2008


INDICE.

Introducción…………………………………………………….………………….. 3
Desarrollo.………………………………………………………………………….. 4
Definición de control de calidad…………………………………………………… 4
Definición de Exactitud……………………………………………………………. 4
Definición de Precisión.……………………………………………………………. 4
Materiales……………...…………………………………………………………… 4
Como elaborar un pool de suero….....……………………………………………… 5
Como elaborar un control……..….....……………………………………………… 5
Técnica………………...……………………………………………………………. 6
Procedimiento….……...……………………………………………………………. 6
Limitaciones del método…………………………………………………………… 7
Cálculos para grafica de control interno.…………………………………………… 7
Reglas de Westgard………………………………………………………………… 8
Conclusiones de la grafica de control interno….…………………………………… 9
Cálculos para grafica de control externo.…………………………………………… 10
Conclusiones de la grafica de control externo….…………………………………… 10
Bibliografía………………………………………………………………………….. 11




INTRODUCCION.

Una de las áreas de la actividad humana en la que la aplicación de técnicas estadísticas ha tenido gran difusión y al mismo tiempo un enorme éxito, es en la de aquellos aspectos que se relacionan con el control de calidad de producción de bienes y suministro de servicios. En los años 80 la aplicación de la filosofía y técnicas del control de calidad en la producción supuso un enfoque revolucionario y tremendamente competitivo.

Aunque inicialmente el control de calidad se aplicó solo a la fabricación industrial, enseguida se extendió su radio de acción a la prestación de servicios, donde también podemos incluir el área de salud, aunque dentro del entorno médico hay sectores que por sus características, más asimilables a la industria, tienen una mayor tradición en el empleo del control de calidad; como son los laboratorios de análisis clínicos (hematología, bioquímica o microbiología), o los bancos de sangre.

En el presente informe vamos conoce como realizar un pool de suero y un control, aplicando metodología que se va a fundamentar en gráficos que nos va a permitir observar la estabilidad (calidad) de saber si trabajamos bien o no durante el proceso de evaluación del analito correspondiente que en este caso fue colesterol, la forma como se calcula el control llevando a cabo todos los pasos, y en cualquier situación inadecuada vamos a evaluar con las reglas de Westgard; lo que permitirá eliminar las causas especiales de variabilidad en la obtención del resultado final.

También vamos a evaluar la calidad interlaboratorio graficándolos con la gráfica de Youden. Y los resultados a graficar en el laboratorio interno son con la gráfica de Levey-jennings.
El colesterol es un esteroide sintetizado a partir de la Acetil Coa, y sirve como intermediario metabólico a otros esteroides, ácidos biliares y vitamina D. la concentración del colesterol total en suero, se ha asociado con enfermedades coronarias, enfermedades metabólicas e infecciosas.


DESARROLLO.

Control de Calidad (CC) – Es un sistema de actividades (tales como la toma de muestras en blanco o duplicadas cuyo fin es controlar la calidad de los datos medioambientales generando un conjunto de datos que se utilizarán para estimar la magnitud de la desviación y la variabilidad que resultase de los procedimientos utilizados para obtener los datos.

Cuando se aplica el concepto de Tecnología de la Información a un laboratorio analítico deben considerarse sus tres grandes vertientes: informatización, automatización y robótica (inteligencia artificial). Cualquiera de ellos está orientado a incrementar la productividad y efectividad operativa (mejorando los parámetros estadísticos). Sus implicaciones son fácilmente previsibles en cuanto a la tendencia a lograr el laboratorio “sin papeles” (ofimática) y resolución rápida de problemas (automatización y robótica) logrando mejoras en precisión y -eventualmente- exactitud.

Exactitud - El grado de concordancia de un valor medido con el valor verdadero o previsto de la cantidad involucrada (Taylor, 1987). El concepto de exactitud incluye tanto la desviación como la precisión.

Precisión - El grado de característica de concordancia mutua de las mediciones independientes como consecuencia de una aplicación repetida de los procesos en las condiciones especificadas (Taylor, 1987).

Un problema muy frecuente a nivel industrial es la ausencia de materiales de referencia que permitan evaluar la exactitud. Por esto, los ejercicios interlaboratorio son cada vez más frecuentes y necesarios. Incluso de obligada participación si nos atenemos a la letra y espíritu de la serie ISO 9000 (y la más específica EN 45000). A pesar de que constituyen una fuente no programada de trabajo para el laboratorio, se alcanzan unos beneficios que no pueden ser obviados por un laboratorio implicado en sistemas de calidad.

Uno de los inconvenientes que se les ha atribuido es el tratamiento de datos no demasiado intuitivo (estudios tipo ANOVA). Por este motivo, en lugar de emplear este tratamiento clásico, se ha acudido a una metodología denominada “método de Youden” que no sólo resulta muy intuitiva sino que permite conclusiones gráficas de forma rápida y sencilla (incluso antes de realizar cálculos).


Materiales para elaborar una mezcla de suero control.

Nevera con freezer.
Pool de suero.
Gasas.
Tubos para almacenar las alícuotas del pool.
Centrifuga.
Pipetas serológicas de 10 ml.
Tubos de centrifugas.
Pipetas micrométricas de 10 ul.

Como se elabora un pool de suero.

1.- Se necesita calcular el volumen que se utiliza a diario del analito que se va a estudiar en este caso es colesterol; y también saber porque tiempo se va a preparar el control ejemplo por 4 meses.
2.- Después se recolectan las alícuotas de suero de cualquier paciente que no tenga ninguna enfermedad contagiosa y tratar de que los sueros no se encuentren hemolizados, ictéricos, o lipémicos. Y se van agregando en un envase preferiblemente oscuro.
3.- Luego se unen estos sueros recolectados en un mismo envase formándose así un pool.
4.- Una vez que se recolecto la totalidad del volumen ya calculado el cual siempre tiene que ser un poco mas por si ocurre un error, se separa en alícuotas de suero para realizar el control de cada día que se va a laborar.
5.- Por último se coloca en el congelador a -200 C.

Como elaborar un control.

a.- Se utilizan las alícuotas de suero que se congelaron del pool. Se descongelan a temperatura ambiente o en baño de agua a 370 C, no se debe calentar porque se corre riesgo de desnaturalizar las proteínas y enzimas de la muestra.
b.- Se homogeniza por agitación por inversión suavemente.
c.- Se filtra con una gasa y se dispensa en un tubo de centrifuga.
d.- Se centrifuga a 3,200 RPM aproximadamente por 20 a 30 min. Esto es para sedimentar las mayas de fibrinas si el suero las posee.
e.- Luego se extrae el suero con una pipeta de Pasteur si extraer el sedimento. Y se agita para homogenizar por 30 min.
f.- Por último se realiza la técnica del kit y se sacan los cálculos.

TECNICA. (Colesterol total enzimático).
Laboratorio Biogramma, C.A.
FUNDAMENTO.

La determinación de Colesterol total está basada en el procedimiento enzimático descrito por Allain donde la colesterol—estearasa (CE) hidroliza los ésteres de colesterol a colesterol libre y ácidos grasos. (4). En presencia de oxigeno, el colesterol libre es oxidado por la colesterol oxidasa (CO) a cholest-4-en-3-one y peróxido de hidrogeno. Cuando el fenol está oxidativamente acoplado con 4-aminoantipirina en el presencia de peroxidasa (HPO), y peróxido de hidrogeno se produce un cromoforo de quinoneimina. La intensidad del color producido es proporcional a la concentración de colesterol y se mide colorimétricamente a /ó cerca de 500nm.

Esteres de Colesterol CE Colesterol + Ac. Grasos
Colesterol + O2 CO Colest-4-en-3-one + H2O2
2H2O2 + 4-aminoantipirina + Fenol HPO quinonenica + 4 H2O

La separación del HDL- colesterol, está basada en la selectividad de los iones fosfotungstico y magnesio para precipitar todas las lipoproteínas con excepción del HDL-colesterol contenido en el líquido sobrenadante, se determina con el mismo método que se determinó el colesterol total.

PROCEDIMENTO.

BLANCO REACTIVO ESTANDAR MUESTRA

REACTIVO COLESTEROL 1,0 ml 1,0 ml 1,0 ml
ESTANDAR (St) 10 ul=(0,010 ml)
MUESTRA (Mx) 10 ul=(0,010 ml)
AGUA (H2O) 10 ul=(0,010 ml)


Incubar en baño de maría por 5 min a 370 C.
Mezclar por inversión.
La reacción es estable por 30 min.
Se debe leer en el espectrofotómetro a 500nm. Se lleva a 0 con el blanco reactivo. Y se leen todos los otros tubos.

V.N de colesterol= menos de 200 mg/dl.

LIMITACIONES DEL METODO.

1.) Niveles de Ácido Ascórbico (vitamina C) tan altos como 10mg % (4veces mayores que los observados después de una masiva ingestión). No interfieren en la prueba.

2.) El presente método de colesterol ha demostrado ser linear hasta 500 mg/dl. Más allá de este límite, las muestras deberán diluirse con solución salina (0.85%), y ensayadas nuevamente. El nuevo resultado deberá multiplicarse por el factor de dilución.


3.) Los anticonceptivos orales en mucha cantidad hacen disminuir los niveles de HDL e incrementar los niveles de LDL. Los estrógenos han estrógenos han reportado efectos diversos.



CALCULOS.
Para realizar la grafica de control interno
MUESTRAS LECTURAS
1 37
2 17
3 41
4 40
5 47
6 41
7 57
8 53
9 51
10 60
11 57
∑ 501

[St]= 200 mg/dl.
Lec. Fc: 722,4.
Lec. Blanco reactivo= 0.


CALCULOS ESTADISTICOS.
X: ∑ [lec]

X= media
N ∑= sumatoria
[lec]= lecturas de las muestras
N= numero de muestras.

X: 501 = 45,5 ~ 46
11

DE: 12,32~ 12.
DE: desviación estándar.

Desviación - Error sistemático inherente a un método o causado por algún artefacto o idiosincrasia del sistema de medición. El error puede ser positivo (indicación de contaminación) o negativo (indicación de pérdida de concentración de analizados) (Taylor, 1987).
1 DE= 1 (DE) ± X
1DE= 1 ( 12 ) ± 46= [58, 34]
2DE= 2 ( 12 ) ± 46= [70, 22]

Con estos valores se realiza la grafica de control interno la grafica de Levey-Jennings. Una vez establecidos los parámetros estadísticos (DE, media, X±DE, X±2 DE y X±3DE), se preparan las gráficas de control de calidad en papel milimetrado.

Se grafica en el eje de las Y las desviaciones estándar calculadas las ± 1 y 2 DE y la X; con sus concentraciones en sus unidades apropiadas. En el eje de las X se grafican los días que se evaluó el control que en este caso fueron 11 días.

Después de haber construido la grafica se grafican las lecturas de los días y se evalúa la corrida según las reglas de Westgard.

La grafica debe llevar su respectivo titulo que siempre es determinación del analito x en este caso (Determinación de Colesterol) y su fuente que es donde se realizo el análisis y cálculos en este caso fue (laboratorio C de bioquímica clínica. Escuela de Cs. De la salud)

REGLAS DE WESTGARD.

1.- Una observación del control supera la X ±2 DE: esta es una regla alarma, que conduce al análisis de los datos de control con otras reglas para juzgar si la serie analítica debe aceptarse o rechazarse. Regla 1:2s.
2.- Un control excede el intervalo media ± 3 DE. Regla 1:3s.
3.- Dos observaciones control consecutivas exceden los límites de la misma media de media ± 2 DE. Regla 2:2s.
4.- Una observación control excede la misma ± 2DE y una segunda observación excede el límite de media -2DE. Regla R:4s.
5.- Cuatro observaciones control consecutivas exceden el límite de la media ± 1 DE. Regla 4:1s.
6.-El rechazo se produce cuando 10 observaciones control consecutivas caen a un lado de la media. Regla 10:x.


CONCLUSIONES

Según las reglas de WESTGARD la Regla 1:2s dice que si un valor se excede de la X ±2 DE se está en una situación de alarma. Se puede rechazar o aceptar la corrida; yo decidí rechazar el valor que se salía de los parámetros debido a que gráfico solo 2 DE y no 3 en este caso el valor que elimine fue el del segundo (2) día.

Entonces mis valores de media y desviación estándar variaron y los volví a re calcular. Ahora son los siguientes:


MUESTRAS LECTURAS
1 37
2 41
3 40
4 47
5 41
6 57
7 53
8 51
9 60
10 57
∑ 484



X: 484 = 48,4~ 48.
10

DE: 8,31~ 8.

NOTA: los datos de los cálculos de desviación estándar estarán junto con las graficas.

La conclusión final de la grafica de Levey – Jennigs; es que están dentro de los parámetros establecidos por las reglas de Westgard. Se cumple todo y la corrida se acepta, esto quiere decir que el control es confiable y se puede trabajar con él para saber si estamos trabajando bien en el laboratorio.

También para saber si se llevar una buena aplicación de la técnica dentro del laboratorio y que se está trabajando adecuadamente con la técnica a la cual estamos evaluando; que en este caso es de colesterol de la casa comercial Biogramma.


CALCULOS. Para la grafica de control externo.

MEDIA (X) DESVIACION (DE) RESULTADOS
CONTROL I 18 2 86
CONTROL II 150 11 89

El control I es el control que se encuentra dentro de los valores normales. Se grafica en el eje de las (X).
El control II es el control de valores anormales. Se graficara en el eje de las (Y).

Calcular las DE para graficar.

Control I
1DE: 1. (2) ± 18= [20, 16]
2DE: 2. (2) ± 18= [22, 14]

Control II
1DE: 1. (11) ± 150= [161, 139]
2DE: 2. (11) ± 150= [172, 128]

CONCLUSIONES.
El método de Youden se aplica para realizar ejercicios inter laboratorio en el que participan varios laboratorios en un lapso de dos años. Los valores obtenidos de repetitividad y reproducibilidad son comparables a los recogidos en la metodología normalizada para el ensayo analítico en particular.

En este caso evaluamos 1 solo laboratorio y no podremos observar la repetitividad y reproducibilidad para compararlos con otros laboratorios; pero el laboratorio no trabajo bien porque este se encuentra fuera del cuadro central que se elabora con las ± 1DE de cada uno de los controles y se encuentra muy fuera de la elipse.

Se encuentra muy por debajo de la ± 3DE, esto quiere decir que el laboratorio no es preciso y no tiene exactitud al aplicar sus técnicas en el laboratorio.

Se grafico en el eje de las X el control de más baja concentración con la media de (18) y el de las Y el de concentración más alta con una media de (150).

BIBLIOGRAFIA.

1. http://www.seh-lelha.org/pdf/calidad.pdf

2. http://www.udc.es/tesis/resumo.asp?REF=268.

3. http://www.camiseagtci.gob.pe/archivos/compromisos/digesa1/06%2001%20Anexo%204%20Glorasio.doc

4. Inserto de Laboratorios BIOGAMMA, C.A para determinación de Colesterol Total Enzimático.

5. Guía práctica de laboratorio # 2 de Preparación de mezcla control. Bioquímica clínica 7mo semestre de Bioanálisis.